운동뉴런 | ioMotor Neurons | 고마바이오텍

특징

• ioMotor Neurons은 lower motor neuron의 in vitro 모델로 활용되어, 운동뉴런 질환 연구에 유용하게 사용됩니다. 
  
• 수일내에 정의된 기능성 운동 뉴런으로 전환되며, 4일차에 주요 운동뉴런 마커 유전자 MNX1(HB9), FOXP1, ISL2 및 콜린성 마커 CHAT 및 SLC18A3(VAChT)의 발현을 보여줍니다.
• 14일째부터 >80%의 세포는 MNX1을 발현하고 성상교세포와의 공동 배양에서 기능적 뉴런 활동을 보여줍니다.
• 단일 배양에서도 기능적 활성이 평가되었으나 유의미한 활성이 나타나지 않았고, 이는 이 운동뉴런이 glial cell 없이는 시냅스 생성을 수행할 수 없는 순수하고 균질한 신경 집단을 형성하는 것을 보여줍니다. 
• 다른 cell과의 co-culture를 통해 기능적인 연구에 사용할 수 있고, 높은 생리학적 동등성을 가지며, 실험에 빨리 이용할 수 있고, clump(덩어리)가 생기지 않아 culture시에 cell이 적게 들고 균일하게 자랍니다.
  

사양

프로토콜

 

참고 데이터

1. ioMotor Neurons acquire a rapid motor neuronal phenotype, without clumping

냉동보존된 ioSensory Neuron의 해동 후, 신속하고 균질하게 뉴런세포로 성장하는 과정을 저속 촬영한 11일간의 타임랩스 비디오입니다.  ​

2. Rapid gain of functional activity

Astrocyte와의 공동배양에서 시간이 지나면서 성숙해 짐에 따라 활성이 증가함을 보여줍니다. MEA에 의해 입증된 바와 같이, 평균 firing rate (전극 스파이크 수를 기록 기간의 총 시간으로 나눈 값)은 실험 과정 전반에 걸쳐 실질적으로 증가하는 것으로 나타났습니다.  

자발적인 신경 활동은 빠르면 14일차부터 나타나며 최종 측정 시점인 42일차까지 계속 증가합니다. 

3. Immunocytochemistry shows protein expression of key motor neuron markers

 Immunofluorescent staining on post-revival day 4 and day 11 demonstrates homogenous expression of the pan-neuronal protein TUBB3, motor neuron specific marker ISL2, the cholinergic marker ChAT and nuclear staining (DAPI).

 Immunofluorescent staining on post-revival day 4 and day 11 demonstrates homogenous expression of the pan-neuronal protein MAP2, motor neuron specific marker HB9, the cholinergic marker VAChT and nuclear staining (DAPI).