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제품 상세

Antibody

6.5 - 270 kDa 범위를 커버하는 3가지 컬러 밴드를 포함하며,
최대 100%까지의 transfer 효과를 개런티하는 Prestained protein ladder를 소개합니다.

특징

 

  • ioMotor Neurons은 lower motor neuron의 in vitro 모델로 활용되어, 운동뉴런 질환 연구에 유용하게 사용됩니다. 
  • 수일내에 정의된 기능성 운동 뉴런으로 전환되며, 4일차에 주요 운동뉴런 마커 유전자 MNX1(HB9), FOXP1, ISL2 및 콜린성 마커 CHAT 및 SLC18A3(VAChT)의 발현을 보여줍니다.
  • 14일째부터 >80%의 세포는 MNX1을 발현하고 성상교세포와의 공동 배양에서 기능적 뉴런 활동을 보여줍니다.
  • 단일 배양에서도 기능적 활성이 평가되었으나 유의미한 활성이 나타나지 않았고, 이는 이 운동뉴런이 glial cell 없이는 시냅스 생성을 수행할 수 없는 순수하고 균질한 신경 집단을 형성하는 것을 보여줍니다. 
  • 다른 cell과의 co-culture를 통해 기능적인 연구에 사용할 수 있고, 높은 생리학적 동등성을 가지며, 실험에 빨리 이용할 수 있고, clump(덩어리)가 생기지 않아 culture시에 cell이 적게 들고 균일하게 자랍니다.

 

 

사양

 

Starting materialHuman iPSC line
DonorCaucasian adult male (skin fibroblast)
FormatCryopreserved cells
Differentiation methodopti-ox™ cellular reprogramming
KaryotypeNormal (46, XY)
Vial sizeSmall: 1 x 10^6 viable cells
Recommended seeding density30,000 cells/cm2
Seeding compatibility6, 12, 24, 96 and 384 well plates
Quality controlSterility, protein expression (ICC), gene expression (RT-qPCR)

 

 

 

프로토콜


ioMotor Neuron은 냉동 보존 형식으로 제공되며 권장 배지에서 재생 시 빠르게 성숙되도록 프로그래밍되어 있습니다.  
Phase 0 단계의 세포를 수령 후, Phase 1, 2 과정을 거쳐 실험에 바로 이용합니다. 
1) Phase 0 : Induction (bit.bio에서 Induction 후 제공)
2) Phase 1 : 고객이 세포를 수령 후 plating 하여 안정화시키는 기간 (2일)
3) Phase 2 : Pre-maintenance 기간 (2일)
4) Phase 3 : 세포가 성숙하는 기간




 

참고 데이터

 

1. ioMotor Neurons acquire a rapid motor neuronal phenotype, without clumping

냉동보존된 ioSensory Neuron의 해동 후, 신속하고 균질하게 뉴런세포로 성장하는 과정을 저속 촬영한 11일간의 타임랩스 비디오입니다.  ​

 

 


 


2. Rapid gain of functional activity

Astrocyte와의 공동배양에서 시간이 지나면서 성숙해 짐에 따라 활성이 증가함을 보여줍니다. MEA에 의해 입증된 바와 같이, 평균 firing rate (전극 스파이크 수를 기록 기간의 총 시간으로 나눈 값)은 실험 과정 전반에 걸쳐 실질적으로 증가하는 것으로 나타났습니다.  

 


 

자발적인 신경 활동은 빠르면 14일차부터 나타나며 최종 측정 시점인 42일차까지 계속 증가합니다. 


 

3. Immunocytochemistry shows protein expression of key motor neuron markers

 


 Immunofluorescent staining on post-revival day 4 and day 11 demonstrates homogenous expression of the pan-neuronal protein TUBB3, motor neuron specific marker ISL2, the cholinergic marker ChAT and nuclear staining (DAPI).

 

 


 Immunofluorescent staining on post-revival day 4 and day 11 demonstrates homogenous expression of the pan-neuronal protein MAP2, motor neuron specific marker HB9, the cholinergic marker VAChT and nuclear staining (DAPI).

 

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0.5 ml Elite Pre-stained Protein Ladder (2 x 0.25 ml) PAL-EPL-500 0.5ml 500
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