루게릭병과 치매 모델 신경세포 | ALS & FTD disease model cell | 고마바이오텍

특징

• CRISPR/Cas9 기술을 이용하여, Wild type ioGlutamatergic Neuron에 TDP-43을 발현하는 TARDBP 유전자에 M337V 변이를 도입한 ioGlutamatergic Neuron 입니다. 
• 이형접합돌연변이 (TDP-43 M337V/WT) 및 동형접합돌연변이 (TDP-43 M337V/M337V) 모델을 제공합니다.
• 바로 실험에 사용할 수 있습니다.
  
• ICC와 RT-qPCR로 검증되었습니다.
• 11일째에 TUBB3, MAP2 및 VLUT2와 같은 pan-neuronal 및 glutamatergic marker를 발현합니다.
• 루게릭병으로 알려져 있는 ALS (amyotrophic lateral sclerosis, 근위축성 측색 경화증) 및 FTD (Frontotemporal Dementia, 전두측두엽 치매) 연구에 이용할 수 있습니다.

종류

1) ioEA1005 | Homozygous mutation (ioGlutamatergic Neurons TDP-43 M337V/M337V) 

• TDP-43 유전자의 대립유전자 모두가 M337V 돌연변이를 갖고 있는 동형접합 돌연변이 모델
• 유전자의 돌연변이로 인해 이 질병과 관련된 표현형이 어떻게 보여지는지를 WT (isogenic control cell)과 이형접합돌연변이(M337V/WT cell)과 비교하기에 유용

2) ioEA1006 | Heterozygous mutation (ioGlutamatergic Neurons TDP-43 M337V/WT) 

• TDP-43 유전자에 하나의 대립유전자가 M337V 돌연변이를 갖고 있는 이형접합 돌연변이 모델
• ALS 또는 FTD 환자에서 확인되는 돌연변이 모델
• 이 돌연변이 유전자는 TDP-43이 세포질내에서 응집되도록 촉진시킴
  

3) ioEA1015 | Heterozygous mutation (ioGlutamatergic Neurons MAPT P301S/WT™) 

• tau 단백질을 코딩하는 MAPT 유전자에 하나의 대립유전자가 P301S 돌연변이를 갖고 있는 이형접합 돌연변이 모델
• FTD 환자에서 확인되는 돌연변이 모델
• tau 단백질이 질병 진행에 미치는 영향을 연구할 수 있음

4) ioEA1008 | Homozygous mutation (ioGlutamatergic Neurons MAPT P301S/P301S™) 

• tau 단백질을 코딩하는 MAPT 유전자에 대립유전자 모두에 P301S 돌연변이를 생긴 동형접합 돌연변이 모델
• FTD 환자에서 확인되는 돌연변이 모델
• tau 단백질이 질병 진행에 미치는 영향을 연구할 수 있음

5) ioEA1009 | Heterozygous mutation (ioGlutamatergic Neurons MAPT N279K/WT™) 

• tau 단백질을 코딩하는 MAPT 유전자에 MAPT 유전자에 하나의 대립유전자가 N279K 돌연변이를 갖고 있는 이형접합 돌연변이 모델
• FTD 환자에서 확인되는 돌연변이 모델
• tau 단백질이 질병 진행에 미치는 영향을 연구할 수 있음

사양 

• Starting material : Human iPSC line
• Donor : Caucasian adult male (skin fibroblast)
• Differentiation method : opti-ox cellular reprogramming (Pawlowski, 2017)
• Karyotype : Normal (46, XY)Vial size :
• Vial size :
  - Small: >1 x 10^6 viable cells
  - Large: >5 x 10^6 viable cells
• Recommended seeding density : 30,000 cells/cm2
• Seeding compatibility : 6 to 384 well plates
• Quality control : Sterility, protein expression (ICC), genotype (Sanger seq) and gene expression (RT-qPCR)
• Product use : These cells are for research use only
• Genetic modification : Homozygous (ioEA1005) or heterozygous (ioEA1006) M337V mutation in the TARDBP gene

실험 결과

​그림 1. Post-revival day 11에서의 glutamatergic neuron-specific marker IF staining 

그림 2. Post-revival day 11에서의 pan-neuronal marker IF staining

그림 3. ioGlutamatergic Neurons TDP-43M337V/WT form structural neuronal networks by day 11

그림 4. 유전자발현분석을 통해 ioGlutamatergic Neurons TDP-43 disease model cell과 isogenic control (WT)이 11일째에 TDP-43을 인코딩하는 TARDBP gene을 발현함을 보여줍니다. 

적용

• FTD 및 ALS 연구
• 신약 발견 및 개발
• 퇴행성 신경질환 모델링
• 고처리량 스크리닝
• 전기 생리학적 분석 (MEA)
• Astrocyte와 co-culture

사이즈

ioGlutamatergic Neurons TDP-43 disease model cell은 6-384well plate에 seeding할수 있고, density는 30,000cells/cm2입니다.

Small과 large vial size로 제공됩니다.

1) small vial은 최소 0.7x24well, 1x96well, 1.5x384well plate에 이용할 수 있는 양입니다.

2) large vial은 최소 3.6x24well, 5.4x96well, 7.75x384well plate에 이용할 수 있는 양입니다.