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제품 상세
합성 IVT mRNA, circular RNA, self-amplifying RNA 제작서비스 이미지

합성 IVT mRNA, circular RNA, self-amplifying RNA 제작서비스

희귀질환 연구 및 암백신 개발 등과 같은 개인 맞춤형 치료제 개발 및 다양한 질환모델에 활용될 수 있는 IVT (in vitro transcribed) mRNA 및 circular RNA, self-amplifying RNA를 합성해 드립니다.

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IVT mRNA 제작서비스 특징  

 

  • IVT (in vitro transcribed) mRNA는 cell-free 조건에서 제작되어 세포 주기에 영향을 받지 않으며, 삽입 돌연변이 유발 위험으로부터 안전합니다. 
  • IVT mRNA는 mRNA의 translation 효율과 안정성에 필수적인 5'cap, 3'poly(A) 시퀀스와 같은 mature eukaryotic mRNA 특성을 그대로 재현합니다.
  • Research grade 뿐 아니라 치료제 모델로 적용할 수 있는 Pre-clinical grade mRNA 제작도 제공해 드립니다. 
  • 제공해 주시는 DNA template로 제작하거나, 혹은 DNA 제작부터 의뢰하실 수 있습니다. 
  • 일반적인 linear 및 circular, self-amplifying 타입으로 선택하실 수 있습니다. 

 

 

IVT RNA 종류별 비교 

 

 

Linear mRNA Self-Amplifying RNA Circular RNA
　 　
Structure Linear; Open 5’ and 3’ end
mRNA exonuclease degradation		 Linear; Open 5’ and 3’ end
mRNA exonuclease degradation		 Close loop; No free 5’ 3’ end
Eliminating mRNA exonuclease degradation
Ribosome recruiting 5’ Cap:
Initiates translation & stabilizes Mrna		 5’ Cap:
Initiates translation & stabilizes mRNA		 nternal Ribosome Entry Site (IRES) :
Initiates translation
ORF • Codon optimization for translation yield
• Modified nucleosides, eg. M1Ψ
• Insert < 20 kb		 • Codon optimization for translation yield
• Modified nucleosides, eg. M5C
• Insert < 6 kb		 • Codon optimization for translation yield
• Insert < 4 kb
UTR Regulatory elements in the 5’ and 3’-UTR stabilize mRNA and increase translation initiation Replicon for further self-replication of the mRNA Include IRES + PIE + other elements
PolyA tail Stabilizes RNA molecule & Prevents degradation Stabilizes RNA molecule & Prevents degradation Not required
Protein Expression +++ Strong +++++ Strongest ++++ Stronger
Expression half-life +++ Shorter +++++ Longest ++++ Longer
Immunogenicity ++++ Low ++ High +++ Medium
Dosage requirement ++ High +++++ Lowest +++ Medium
Novelty +++ Traditional ++++ Novel +++++ Novel

 

 

Quality Control and Specification  

 

QC Item Test Method Specification RUO
Default		 RUO
Upgrade		 Preclinical
Default		 Preclinical
Upgrade
Identification Appearance Visual Inspect Clear and free of foreign particles Y Y Y Y
RNA Length Capillary Electrophoresis Target ± 30% X Y Y Y
RNA Length Agarose Gel Electrophoresis Expected size band detected Y X X X
Poly A Length Enzyme digestion and CE Target ± 30% X Y Y Y
RNA Content UV Absorbance Target ± 5% Y Y Y Y
PH pH meter Target ± 0.5 Y Y Y Y
Buffer Specification Client Spec N/A Y Y Y Y
Purity A 260/280 Ratio UV Spec 1.70 ~ 2.30 Y Y Y Y
Capping Efficiency LC-MS ≥ 90% X Y Y Y
Size based purity Capillary Electrophoresis ≥75% X Y Y Y
Impurity Total protein residue Nano Orange Assay ≤ 1% X X Y Y
Plasmid DNA Residue qPCR ≤ 0.1% X X X Y
dsRNA Slot-blot ≤ 1% X X Y Y
Safety Endotoxin Semiquantitative < 10EU/mg Y Y X X
Endotoxin Quantitative < 10EU/mg X X Y Y
Bioburden Sdirect Inoculation No Growth after
48 hrs		 X X X Y

 

 

mRNA QC 서비스 


  • 직접 제작하신 mRNA를 보내어 QC를 신청하실 수 있습니다.
  • QC 항목에 따라 1-3주 소요됩니다. 
OptionmRNA QC TestTAT, daysAmount
Required		    Method
1PolyA Tail Length Assay7300pmolRNase digestion and purification to recover the polyA tail fragment, followed by polyA tail length analysis by small RNA bio-analyzer kit assay or LC-MS.
2Capping Efficiency Assay14-21300pmolRNase digestion to isolate a short oligo from the 5’ end of the mRNA sample to be analyzed by LC-MS to calculate the capping efficiency.
3dsRNA Residue Assay1040ugSlot-blot assay using a dsRNA-specific antibody to test for dsRNA residues in mRNA sample.
4RNA Capillary Electrophoresis510ugBioanalyzer assay to test RNA length and purity.
5Total Protein Residue Assay710ugNano-orange assay to test the residual protein amount in mRNA sample.
6Plasmid DNA Residue Assay145ugq-PCR assay to test the residual plasmid DNA residue amount in mRNA sample.
7Quantitative Endotoxin Assay55ugGenScript ToxinSensor™ Chromogenic LAL Endotoxin Assay to test endotoxin level in mRNA sample.
8BioBurden Assay14200ugTSA plate to recover a broad range of microorganisms such as aerobic and anaerobic bacteria from liquid.

 

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