Comet Assay Tools | Single Cell Gel Electrophoresis | 고마바이오텍

특징

• 세포를 아가로스에 혼합 후 슬라이드에 놓고 세포를 용해시키면, DNA가 변성되고 전기영동을 거치는 동안 혜성 (Comet) 모양을 형성합니다. 
• 손상되지 않은 DNA는 Comet의 head를 생성하고, 손상된 DNA는 세포 밖으로 이동하여 tail을 형성합니다. 
• Comet assay는 중성 조건에서 이중 가닥 절단을 감지할 수 있고, 또한 알칼리성 조건에서 단일 및 이중 가닥 절단을 포함한 DNA 소량 손상을 감지할 수 있습니다. 
• DNA "Comet" 꼬리 모양과 이동 패턴을 평가하면 꼬리 길이, 꼬리의 DNA 백분율 및 꼬리 모멘트로 표현되는 DNA 손상을 평가할 수 있습니다.
• 사용이 쉽고 단일 세포에서 DNA 손상과 복구를 측정할 수 있으므로, 유전 독성학 분야와 인간 및 환경 생물 모니터링 분야에서 유용합니다. 

실험 원리 

1. 세포와 low melting point agarose (LMA agarose)를 37도에서 혼합합니다.

2. 세포를 전용 CometSlide에 immobilization 시킵니다.

3. 세포를 lysis solution으로 처리하여 DNA로부터 membrane과 histone 단백질을 제거합니다.

4. 시료를 alkali로 처리합니다. 

5. 시료를 intercalating dye로 염색하여 형광 현미경으로 가시화 합니다. DNA break를 관찰합니다.

실험 구성품  

주요 제품

▒ CometAssay Electrophoresis System II (#4250-050-ES) 

• 냉각 팩 챔버와 일체형 플라스틱 본체로 일정한 완충액 온도를 유지합니다.
• Slide Tray Overlay는 일관된 결과를 위해 완충액을 최적으로 유지합니다.
• 특별히 설계된 트레이는 2, 20 , 96 well 슬라이드를 장착할 수 있고 전기영동 중에 올바른 위치를 유지합니다.
• CometAssay kit 및 CometAssay Control Cell과 함께 사용하도록 최적화되었습니다.

▒ CometAssay Electrophoresis Starter Kit (#4250-050-ESK) 

• Comet assay 실험을 수행하기 위한 전기영동 장치, agarose, lysis buffer, slide, control cell등 모든 제품이 제공되는 스타터 팩키지 입니다.
• 편리한 크기의 바로 사용 가능한 low melting point agarose(LMAgarose)가 제공됩니다. 
• 알칼리성 또는 중성 Comet assay에 적합한 용해 용액이 제공됩니다. 
• Kit의 구성
  • CometAssay Electrophoresis System
  • CometAssay Lysis Solution
  • CometAssay LMAgarose
  • CometSlides (2 Well, 25 Slides)
  • 200 mM EDTA, pH 10
  • CometAssay Alkaline Control Cells

▒ CometAssay Silver Staining Components Kit (#4254-200-K) 

• Comet assay 수행후에 실버염색을 위한 시약세트입니다. 
• Kit의 구성
  • 20X Staining Reagent #1
  • 20X Staining Reagent #2
  • 20X Staining Reagent #3
  • 2X Staining Reagent #4
  • 10X Fixation Additive

▒ CometAssay Single Cell Gel Electrophoresis Assay (#4250-050-K) 

• Single 혹은 double DNA break를 분석합니다.
• DNA damage에 대한 세포의 반응을 연구하기 위해 이용됩니다.
• DNA repair Inhibitor 스크리닝에 이용됩니다.
• Chemical toxicity 테스트에 이용됩니다. 
• Environmental mutagen 스크리닝에 이용됩니다. 
• Kit의 구성
  • CometAssay Lysis Solution
  • CometAssay LMAgarose
  • CometSlides (2 Well, 25 Slides)
  • 200 mM EDTA, pH 10

▒ CometAssay Alkaline Control Cells (#4256-010-CC) 

• 다양한 수준의 DNA damage가 반영되어 있는 대조군 세포 입니다.
• 통계적으로 구별되는 집단과 비교할 수 있는 다양한 DNA 손상 패턴을 제공합니다. 
• 전기영동 방법을 표준화할 수 있습니다.

▒ CometAssay Analysis Software (#4260-000-CS) 

• CometAssay 또는 CometChip과 함께 사용하도록 설계되었습니다.
• 알칼리성 또는 중성 혜성 분석을 수행합니다.
• 꼬리의 DNA 백분율, 꼬리 모멘트, 꼬리 길이, 통합 세포 강도, 꼬리 면적, 꼬리 모멘트 암, 꼬리 관성 모멘트 및 단편화에 대한 측정값을 얻습니다.
• 요약 통계 자료는 쉽게 export가 가능합니다. 

실험 결과