듀센 근이영양증 모델세포 | Duchenne's Muscle Dystrophy model cell | 고마바이오텍

특징

• Duchenne Muscle Dystrophy 연구를 위한 ready-to-plate cell로, 3일간의 안정화 기간과 8일간의 성숙화 기간 후 바로 사용할 수 있습니다. 
• Dystrophin을 코딩하는 DMD 유전자의 exon 44를 hemizygous deletion 시킨 제품(#io1018) 과 exon 52를 hemizygous deletion 시킨 제품(#io1019)으로 제공합니다. 
• Axon deletion이 근육 세포 기능에 미치는 영향을 연구하고 ASO-mediated exon skipping와 같은 Distrophin restoration 등에 대한 연구를 할 수 있습니다. 
  
• ioSkeletal Myocytes(#io1002)를 isogenic control로 사용할 수 있습니다.

종류

1) io1018 | ioSkeletal Myocytes DMD Exon 44 Deletion™

• ioSkeletal Myocytes DMD Exon 44 Deletion은 Dystrophin 단백질을 암호화하는 DMD 유전자의 엑손 44에서 유전적으로 조작된 반접합성 결실을 지닌 opti‑ox™ 정밀 재프로그래밍된 골격 근세포입니다.
  

2) io1019 | ioSkeletal Myocytes DMD Exon 52 Deletion™

• ioSkeletal Myocytes DMD Exon 52 Deletion은 Dystrophin 단백질을 암호화하는 DMD 유전자의 엑손 52에서 유전적으로 조작된 반접합성 결실을 지닌 opti‑ox™ 정밀 재프로그래밍된 골격 근세포입니다.
  

적용

• ASO-mediated exon skipping
• Muscular dystrophy research
• Dystrophin restoration
• Muscle disease modelling

사양 

프로토콜

ioSkeletal Myocytes DMD Exon Deletion cell은 냉동 보존 형식으로 제공되며 권장 배지에서 재생 시 빠르게 성숙되도록 프로그래밍되어 있습니다.  

Phase 0 단계의 세포를 수령 후, Phase 1, 2 과정을 거쳐 실험에 바로 이용합니다. 

1) Phase 0 : Induction (bit.bio에서 Induction 후 제공)

2) Phase 1 : 고객이 세포를 수령 후 plating 하여 안정화시키는 기간 (3일)

3) Phase 2 : 세포가 성숙하는 기간​

참고 데이터

1. ioSkeletal Myocytes DMD Exon 44 Deletion disease model cells express skeletal muscle cell specific markers and lack expression of Dystrophin, demonstrating a Duchenne muscular dystrophy phenotype 

Cell revival 후 10일째의 면역세포화학 염색은 수축 장치의 구성 요소인 Desmin의 강력한 발현과 ioSkeletal Myocytes DMD Del Ex44/Y 질병 모델 세포에서 Dystrophin의 발현이 없음을 보여 주는 반면, wild type isogenic 대조인 ioSkeletal Myocytes는 두 가지를 모두 표현합니다. 

2. ioSkeletal Myocytes DMD Exon 44 Deletion disease model cells demonstrate gene expression of key myogenic markers following reprogramming

리프로그래밍 후 ioSkeletal Myocytes DMD Exon 44 Deletion(DMD DelEx44/Y) 및 wide type ioSkeletal Myocytes(WT Control)는 다능성 유전자(A)의 발현을 하향 조절하는 동시에 주요 근원성 마커(B)의 예상 발현을 입증합니다.  

3. ioSkeletal Myocytes DMD Exon Deletion disease model cells show absence of Dystrophin protein by immunocytochemistry, demonstrating a Duchenne muscular dystrophy phenotype 

ioSkeletal Myocytes DMD Exon 44 Deletion 및 DMD Exon 52 Deletion 질병 모델 세포와 ioSkeletal Myocytes wild type 대조군을 well당 32,000개 세포의 밀도로 96웰 플레이트에서 배양했습니다. Dystrophin 및 Myosin Heavy Chain (MHC)에 대한 면역세포화학 염색을 cell revival 후 10일째에 수행했습니다. 데이터는 MHC의 강력한 발현을 보여주지만, wild type 대조군과 비교하여 ioSkeletal Myocytes DMD Del Ex44/Y 또는 DMD Del Ex52/Y 질병 모델 세포에서는 Dystrophin의 발현이 없음을 보여주며, 이는 Duchenne 근이영양증 표현형을 입증합니다.