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[FAQ] Oxidative stress는 어떻게 측정하나요?

ROS, Antioxidant, DNA/RNA damage등, Oxidative Stress Assay 방법에 대한 FAQ 입니다.

1. Oxidative stress는 어떻게 측정하나요?

 

세포의 Oxidative stress는 일반적으로 3가지 방법으로 측정됩니다.

ROS(Reaction Oxygen Species) 여부를 직접적으로 확인하는 방법과 anti-oxidant 여부를 이용한 간접적인 측정, 그리고 산화에 의해 손상된 단백질, 지질, DNA, RNA를 이용한 방법이 있습니다. 일반적으로 ROS는 불안정하기 때문에 Protein Carbonyl, 8-OHdG, TBARS의 양을 측정하는 방법이 많이 사용됩니다.  

 

 

2. Species에 따라 Oxidative Stress Assay Kit를 다르게 선택해야 하나요?

 

Species-independent 제품으로 종에 상관없이 분석이 가능합니다. Biomolecule이 아닌 Oxidative stress로 인해 생성된 Damage marker를 측정합니다.  

  

 

3. 샘플 타입에 따른 분석 Kit는 어떤 것이 있나요?

  

  Marker or Type of Damage   Sample Type
  Cells   Tissues   Blood   Urine   Other
  DNA / RNA Damage
  8-hydroxyguanosine (8-OHG)   X   X   X   X   Cerebrospinal fluid
  8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG)   X   X   X   X    
  Abasic (AP) sites   X   X            
  BPDE DNA Adduct   X   X            
  Double-strand DNA breaks   X                
  Comet Assay (general DNA damage)   X                
  UV DNA Damage (CPD, 6-4PP)   X                
  Lipid Peroxidation
  4-Hydroxynonenal (4-HNE)   X   X   X        
  8-iso-Prostaglandin F2alpha (8-isoprostane)   X   X   X   X    
  Malondialdehyde (MDA)   X   X   X   X    
  TBARS   X   X   X   X    
  Protein Oxidation / Nitration
  Protein Carbonyl Content (PCC)   X   X   X        
  3-Nitrotyrosine   X   X   X        
  Advanced Glycation End Products (AGE)   X   X   X        
  Advanced Oxidation Protein Products (AOPP)   X   X   X        
  BPDE Protein Adduct   X   X   X        
  Kidney Injury Molecule-1 (KIM-1)               X    
  Reactive Oxygen Species
  Intracellular ROS   X                
  In Vitro ROS   X   X   X   X    
  Hydrogen Peroxide   X   X   X   X    
  Nitric Oxide   X                
  Antioxidants
  Catalase   X   X   X        
  Glutathione   X   X   X   X    
  Superoxide Dismutase   X   X   X        
  Oxygen Radical Antioxidant Capacity (ORAC)   X   X   X   X   Food samples
  Hydroxyl Radical Antioxidant Capacity (HORAC)   X   X   X   X   Food samples
  Total Antioxidant Capacity (TAC)   X   X   X   X   Food samples
  Cellular Antioxidant Assay                   Food samples, Antioxidants

  

 

 4. 8-OHdG DNA Damage ELISA(Cat # STA-320)를 사용할 때, DNA를 추출해야 하나요?

 

샘플이 소변, 혈장, 혈청, 뇌척수액 또는 타액과 같은 체액인 경우 DNA를 추출할 필요가 없습니다. 샘플에 불용성 입자가 있는 경우 샘플을 spin down 할 필요가 있습니다. 그렇지 않으면 전처리 없이 바로 사용할 수 있습니다. 세포 및 조직 샘플의 경우 먼저 DNA를 추출해야 합니다. 

  

 

5. OxiSelect™ 8-OHdG ELISA Kit(Cat # STA-320)에서 필요한 최소 DNA 양은 얼마인가요?

 

8-OHdG 를 정확하게 detection하기 위해서는 well 당 최소 2 ug의 DNA가 필요합니다. 

  

 

6. 샘플 내 Human 8-isoprostane (8-iso-Prostaglandin F2α) 농도의 정상 범위는 어떻게 되나요?

 

정상적인 Human plasma에서는 40-100 pg/mL, Urine에서는 500-2000 pg/mL의 농도로 8-isoprostane이 존재합니다. 

  

 

7. Serum에서 Protein oxidation을 확인할 때, 희석을 해야하나요?

 

분석 전 BCA 혹은 Bradford assay 통하여 Protein의 농도를 확인한 후, 최종 10 ug/mL의 농도가 되도록 PBS로 희석해야 합니다. 

 

  

8. Superoxide Dismutase Activity Assay Kit를 이용하여 모든 Superoxide dismutase를 검출할 수 있나요?

 

SOD enzyme은 cytosolic Cu/Zn-SOD, mitochondrial Mn-SOD, extracellular Ec-SOD로 분류됩니다. OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay Kit(Cat #. STA-340)는 이 세 가지의 SOD를 모두 검출 할 수 있습니다. 

 

 

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