세포막 및 세포 표면 염색시약 | Membrane or Surface Stain | 고마바이오텍

주요 제품

▒ CellBrite™ Steady Membrane Staining Kits 

• 일반적인 세포막 염색시약은 라벨링 후 내포 작용(Endocytosis)에 의해 세포 내부로 빠르게 흡수되어 표면 신호가 금방 사라집니다. CellBrite® Steady 염색시약은 세포 표면과 세포 내부 구획 사이에서 평형을 유지하는 독특한 프로브로, 배양 중인 세포 표면막을 24시간에서 수일까지 장시간 지속적으로 촬영할 수 있습니다.
• 키트에 포함된 ‘CellBrite® Steady Enhancer’를 사용하면 세포 내부로 들어간 형광 신호를 줄이거나 마스킹(차단)할 수 있습니다. 이를 통해 세포 내부 노이즈 없이 세포의 윤곽이나 경계만을 선택적으로 선명하게 시각화할 수 있습니다.
• 청색(Blue)부터 근적외선(Near-IR) 영역까지 총 9가지 색상 옵션이 제공되어 원하는 채널에서 촬영이 가능하며, STORM(초고해상도 현미경) 호환 옵션도 포함되어 있습니다.
• 완전 배양 배지(Complete cell culture medium) 상태 그대로 세포에 빠르고 균일하게 염색할 수 있어 편리합니다.
• Kit 구성품
• CellBrite® Steady Dye
• CellBrite® Steady Enhancer

Live MCF7 cells stained with CellBrite® Steady dyes for 30 minutes and imaged by confocal microscopy without a wash step.

T47-D spheroid stained with NucSpot® Live 650 (nuclei, magenta) and CellBrite® Steady 785 (membranes, cyan). T47-D cells were plated at 20,000 cells per well in a LICORbio 3D Essentials Kit ULA 96-well plate and cultured for 48 hours. The spheroid was stained with dyes in complete medium for 24 hours without a wash step, then imaged on an Evident FV4000 confocal microscope with 20X objective to create a tile-stitched 3D projection image; scale bar: 250 um.

​▒ CellBrite™ Cytoplasmic Membrane Dyes 

• 청색(Blue), 녹색(Green), 오렌지색(Orange), 적색(Red), 근적외선(NIR) 등 다양한 색상으로 제공됩니다.
• 세포 독성이 낮고 세포 간 염색시약 이동이 최소화되어, 세포를 장기간 추적(Tracking)하거나 이식(Transplantation) 연구 등에 유용합니다.
• 살아있는 세포뿐만 아니라 포름알데히드로 고정된 세포의 세포막 염색에도 사용할 수 있습니다.
• DiB(청색), Neuro-DiO(녹색), DiI(오렌지색), DiD(적색) 기반의 유기 염색시약으로 세포막 구조를 효율적이고 영구적으로 라벨링합니다. 여러 색상을 조합하여 다양한 세포군을 라벨링하면 세포 간 상호작용이나 세포 융합 연구에 유리합니다.
• 소동물 이미징(In vivo) 연구에 특화되어 비침습적으로 세포의 이동과 귀환(Homing)을 관찰할 수 있습니다. 긴 탄소 사슬(18개)과 수용성 그룹이 결합한 독특한 화학 구조 덕분에, 잘 녹지 않거나 침전물이 생기던 기존 탄소시아닌 염색시약(DiI, DiO, DiR 등)의 단점을 극복하여 용해도가 높고 안정적인 염색이 가능합니다. 

HeLa cells were grown on poly-lysine-coated coverslips, fixed with PFA, and permeabilized 10 minutes with Triton® X-100. Cells were stained with CellBrite® Blue and washed. Cells were then blocked with fish gelatin blocking agent in PBS without detergent, and stained with CF®555 Nucleolin Antibody clone 364-5 (red), CF®640R Mitochondrial Marker Antibody clone 113-1 (magenta), and NucSpot® 470 (green).

▒ CellBrite® Fix Membrane Stains

• DiO, DiI, CellMask™, PKH 등 기존의 지질친화성(Lipophilic) 염색제들은 포름알데하이드 고정은 가능하지만, 계면활성제 투과화나 메탄올 고정 과정을 거치면 세포막에서 염색제가 씻겨 나가버립니다. CellBrite® Fix는 계면활성제 투과화 및 메탄올 고정을 모두 견뎌내는 유일한 세포막 염색제입니다. 세포막을 염색한 후, 세포 내부를 투과화하여 항체를 이용한 세포 내 면역염색과 병행할 수 있습니다.
• 세포 종류에 따라 결합 대상이 달라지는 WGA 같은 렉틴과 달리, 세포 종류에 구애받지 않는 보편적인 세포막 염색제입니다.
• 세포막에 축적된 후 세포막 단백질과 공유 결합을 형성하여, 고정/투과화 후에도 표면 염색이 잘 유지됩니다.
• 수용성 환경에서는 형광이 약하지만, 세포막에 결합하는 순간 강한 형광을 발하므로 배경 노이즈(Background)가 매우 낮고 특이성이 높습니다.
• 기존 DiO, DiI에 비해 수용성이 좋아 훨씬 균일하게 염색되며, 세포 독성이 없고 세포 간에 염색제가 쉽게 이동하지 않습니다.
• 살아있는 세포의 외막을 15분 만에 밝고 균일하게 염색합니다.
• 녹색(Green), 적색(Red), 원적외선(Far-red) 3가지 형광 색상으로 제공됩니다. 특히 CellBrite® Fix 488은 SIM을 통한 엑소좀(Exosome) 초고해상도 이미징 분석으로 검증되었습니다.
• 동물 세포뿐만 아니라 효모(Yeast) 및 박테리아(그람 양성/음성 모두) 염색에도 사용할 수 있습니다. 

A. Live HeLa cells stained with 1X CellBrite™ Fix 488 for 15 minutes at 37°C.

B. HeLa cell membranes were stained with CellBrite Fix 555 (red) for 15 minutes at 37°C, then fixed with MeOH. Mitochondria were stained with CF®640R Anti-Mitochondrial Marker clone 111-3 (cyan) and nuclei were stained with NucSpot® 470 (green).

C. HeLa cells labeled with CellBrite™ Fix for 30 minutes at room temperature, then fixed with paraformaldehyde and permeabilized with Triton™ X-100.

 

Cells were labeled with the indicated dye for 5 minutes at 37°C, then fixed with 4% paraformaldehyde (PFA) for 20 minutes at room temperature, followed by permeabilization with PBS/0.1% Triton® X-100 for 10 minutes at room temperature.