1. CellBrite®, CellBrite® NIR, CellBrite® Fix, MemBrite® Fix의 차이는 무엇인가요?
CellBrite® Cytoplasmic Membrane Stain 은 살아있는 세포나 고정된 세포의 membrane을 염색하기 위한, 순하고 무독성이며 안정적인 라벨링을 위한 친유성 염료입니다. CellBrite® 염색 전후에 포름알데히드로 세포를 고정할 수 있지만, 투과성 또는 메탄올 고정에 대한 내성이 좋지 않아 면역형광(IF) 염색과 같이 사용하지 않습니다.
이런 용도로는 CellBrite® Fix 및 MemBrite® Fix 를 이용합니다. CellBrite® Fix Membrane Stain은 원형질막에 빠르게 축적되는 형광성 반응성 막 염료입니다. 지질에 통합되면 형광성을 띠고 동시에 안정적인 표지를 위해 막 단백질과 공유적으로 반응합니다. 염색은 세척 없이 한 단계로 단 15분이면 됩니다. CellBrite® Fix는 포유류 세포, 효모 및 박테리아를 염색합니다.
CellBrite® NIR 는 소동물의 NIR 이미징 시스템과 호환되는 근적외선 형광을 가진 CellBrite® 염료입니다.
2. CellBrite® 또는 MemBrite®를 사용하여 엑소좀이나 세포외소포(EV)를 염색할 수 있을까요?
네, 일부 제품을 사용하면 가능합니다. CellBrite® Fix, MemBrite® Fix, CellBrite® Steady 등을 사용하면 EV를 효율적으로 염색할 수 있습니다.엑소좀막을 염색 하려면 ExoBrite™ EV Membrane Stain을 권장합니다 .
3. CellBrite®dye와 PKH dye의 차이점은 무엇인가요?
Biotium의 CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dyes는 일반 배양 배지에 직접 첨가하여 배양 중인 부유 세포 또는 부착 세포에 균일하게 라벨링 할 수 있는 염료 전달 솔루션입니다. PKH 염료도 세포막 라벨링을 위한 염료이지만 CellBrite®와 달리 PKH 염료로 라벨링하려면 여러 단계가 필요하며 세포막 무결성 및 생존력에 부정적인 영향을 미칠 수 있는 등삼투압 만니톨 로딩 배지 iso-osmotic mannitol loading medium)에 세포를 배양해야 합니다.
CellBrite® Fix dye는 등장 완충액(isotonic buffer)에서 빠르고 간단하게 라벨링을 할 수 있습니. CellBrite® Fix로 라벨링한 후 세포를 고정하고 투과시킬 수 있습니다.
4. 친유성 CellBrite® dye와 호환되는 mounting media는 무엇입니까?
CellBrite® dye는 PBS(또는 기타 수성 완충액)에서 직접 이미징하는 것이 좋습니다. 커버슬립은 PBS를 사용하여 장착하고 CoverGrip™ 또는 매니큐어 와 같은 적절한 커버슬립 실런트로 밀봉해야 합니다 . 염색된 샘플은 몇 주 이상 동안 4°C에서 PBS에 저장할 수 있습니다.
CellBrite® dye는 글리세롤 기반 mounting media와 호환되지 않습니다. 그 결과 염색이 변경되고 배경이 높아집니다. 유기적 mounting 적합하지 않습니다.
5. CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dye로 37˚C가 아닌 실온이나 그 이하에서 세포를 염색할 수 있을까요?
네, CellBrite® Cytoplasmic Membrane Dye 염색은 실온 이하에서 세포를 염색할 수 있습니다. 하지만, 염료의 내재화(internalization)이 감소할 수 있고, 4°C에서 염색하면 염료가 침전되거나 얼룩이 고르지 않을 수 있습니다.
6. CellBrite®Blue(DiB) 라벨링 솔루션에 침전물이 있습니다. 어떻게 해야 합니까?
DiB Cell Labeling Solution을 37°C로 10분 이상 가열한 후 용액을 위아래로 피펫팅하거나 vortex하여 완전히 녹을 때까지 섞어줍니다.
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