cAMP Hunter eXpress GPCR Assay Kit (cAMP 분석) | 고마바이오텍

특징

• cAMP Hunter eXpress GPCR Assay Kit는 Ligand가 receptor에 binding된 후 세포내 cAMP 레벨의 변화를 측정하기 위해 이용됩니다. 
• Cell lines, primary cells, membrane preparations, serum sample등 다양한 샘플내의 cAMP level을 측정할 수 있습니다.  
• cAMP Hunter™ Gs 세포주는 자연적으로 Gs coupled wildtype GPCR을 과발현하고 수용체의 agonist(작용제) 자극에 대한 반응으로 세포내 cAMP 수준의 증가를 감지하도록 설계되었습니다.
  

원리 

• Gas(자극) receptor의 경우, ligand가 binding되면 adenylate cyclase가 활성화되어 cAMP 생산이 증가되고, 이로인해 PKA를 활성화 시킵니다.
• Gai(억제) receptor의 경우, ligand가 binding되면 adenylate cyclase가 억제되어 cAMP 생산을 억제하고, 이로인해 PKA의 활성도 억제됩니다. 
• 따라서 세포내 cAMP가 많이 생산되어 있는 상태에서는 Anti-cAMP와 많이 반응하고, 그 결과 항체와 반응하지 못한 free ED-cAMP가 EA와 결합하여 active EFC enzyme을 형성하여 형광이 높게 나타납니다.

사용 방법  

• 사전 검증된 냉동 ready-to-use eXpress cell을 plating하고 small molecule이나 biologics로 자극을 유도한 후 프로토콜에 따라 분석 시약을 세포에 추가하기만 하면 됩니다. 

 구성

Hunter eXpress GPCR Assay Kit

• Ready-to-assay cAMP Hunter eXpress Cells
• Detection Kit (cAMP Lysis Buffer, Solution, Antibody Reagent, Standard, Substrate Reagent 1 & 2, Forskolin, Cell Assay Buffer)
• Assay Complete Cell Plating Reagent
• 96-well white-walled clear-bottom tissue culture treated plate

Cell Line Assay Kit

• Cell Line
• Cell Culture Kit
• Thawing Reagent
• Freezing Reagent 
• Cell detachment Reagent
• Antibiotics
• Detection Kit
• Cell Plating Reagent
• Assay Buffer

분석 GPCR 타겟