Mouse Tail Direct PCR Kit | 고마바이오텍

특징

• DNA를 뽑지않고 mouse tail로 바로 PCR을 수행하므로, 시간이 단축되며 간편합니다.
• Proteinase K (PK)를 처리할 필요가 없어 비용과 스텝을 줄일수 있습니다.
• Overnight incubation을 생략하고, 단 10분 lysis 과정을 통해 template를 얻을 수 있습니다.
• Hot Start Taq을 이용하여 비특이 반응을 줄이고 PCR 효율을 높혔습니다.
• Direct PCR buffer를 mouse tail 조건에 최적화시켜, 좋은 결과를 보장합니다.
• 조작을 최소화함으로써 오염의 위험과 번거로움을 줄여줍니다.
• Transgenic mouse genotyping에 적용하면 효과적입니다.
• Mouse ear로도 사용이 가능합니다.

구성

• 2X EzWay Direct Taq PCR MasterMix
• 2.5X Mouse Tail Direct Lysis Buffer
  
• 4X Magic Buffer
• Positive Control
• Control Primer

실험 방법 

 1) Mouse tail을 1-2mm 크기로 자른다.

 2) 함께 제공되는 Lysis buffer에 넣고 60°C에서 10분간 incubation 한다.

 3) Vortex나 spin down

 4) 상층액 1ul를 떠서 바로 PCR을 수행한다.

데이터

Direct PCR from mouse tail tissue : 

10mg의 mouse tail을 lysis buffer로 lysis를 수행하여 각각 2, 0.2, 0.04, 0.02ul 의 농도로 PCR을 수행하였다. 

PK 처리 없이 60°C에서 10분 incubation 만으로도 깨끗하게 PCR 증폭이 이루어짐을 확인할 수 있었다.

Lane 1,3,5,7 : Direct PCR after lysis using Proteinase K at 56°C for 10 min and 95°C for 5 min

Lane 2,4,6,8: Direct PCR without PK treatment. Incubation at 60°C for 10 min