[FAQ] Exosome & EV Staining에 대한 FAQ 입니다. | 고마바이오텍

1. CellBrite와 MemBrite Stain으로 exosome/extracellular vesicle을 염색할 수 있나요?

CellBrite Cytoplasmic Membrane Dye는 EV를 효과적으로 염색하지 못하지만 CellBrite Fix, MemBrite Fix, CellBrite Steady는 엑소좀을 염색할 수 있습니다.

하지만 exosome membrane 염색에는 ExoBrite EV Membrane Stain을 사용하시는 것을 추천합니다. 

2. ExoBrite EV Membrane Stain은 어떤 특징이 있나요?

이 제품은 exosome 염색용으로 특별히 고안되었고, 백그라운드가 적어 signal-to-noise가 좋습니다. 항체와 co-stain이 가능하며 bead-bound exosome과도 사용할 수 있습니다. 

3. ExoBrite EV Membrane Stain과 항체로 엑소좀을 동시에 염색할 수 있나요?

네, 엑소좀과 EV는 ExoBrite EV Membrane Stain과 형광 항체로 동시에 염색할 수 있습니다. 

정제된 엑소좀의 경우, 엑소좀을 1X ExoBrite 1ml과 1ug 형광 항체로 염색했을때 좋은 결과를 보여주었습니다. 

비드가 결합된 (bead-bound) 엑소좀의 경우, 먼저 항체로 염색한 다음 ExoBrite EV Membrane Stain으로 순차적으로 염색하고, 그 사이에 세척 단계를 거치면 최상의 결과를 얻을 수 있습니다. 

염색을 동시에 수행하면 항체 신호는 영향을 받지 않지만, ExoBrite 신호는 약 25% 감소합니다. 이 결과는 비드 결합 엑소좀을 10X ExoBrite 100ul와 1ug 형광 항체로 염색했을때 관찰되었습니다. ExoBrite와 항체의 비율을 다르게 사용하면 결과가 달라질 수 있습니다.

4. 정제된 엑소좀을 염색하는데 사용하기 위한 항체가 있나요?

SEC으로 정제된 엑소좀을 CD9, CD63, CD81 항체로 flow cytometry를 이용하여 염색할 수 있습니다.