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[NETRI] 3D 오가노이드 제작을 위한 Duplex Organoid-on-chip 이미지

[NETRI] 3D 오가노이드 제작을 위한 Duplex Organoid-on-chip

오가노이드 등 3D cell culture를 위한 microfluidic device인 Duplex chip을 소개합니다.

특징 

 

  • NETRI Duplex well 3D OoC는 Human brain cell 조직을 대체하여 약물의 대용량 스크리닝이나 뇌독성 평가에 이용되는 Cerebral organoid를 제작하기 위한 미세유체칩 입니다. 
  • 기존의 24well plate와는 달리, cell과 media 처리 공간을 구분함으로써, Cerebral organoid가 균일하고 일정한 크기로 성장하고, necrotic core의 생성을 막아, 재현성있는 결과를 제공합니다. 

 

 

Duplex Well 포맷  

 

  • Cell을 seeding하는 open well과 media를 처리하는 large channel로 구성되어 있고, 하단의 porous membrane을 통해 media가 cell에 공급됩니다. 
  • Large channel을 통해 media 공급과 제거가 용이합니다. 

 

 

Brain Organoid-On-Chip 프로토콜 

 

 

 

  • D0 : hiPSC로부터 Embryoid Body (EB) 생성
  • D2 : EB를 회수하여 dorsal forebrain으로 분화 
  • D18 : NETRI 3D Duplex Well에 처리
  • D60 : 배양 완료. RNA expression level 확인됨. 세포구조 조직 개선
  • 최대 D120까지 viability와 morphology 유지

 

 

 실험 결과

 

1. Reproducibility 비교 실험 (24-well plate vs. 3D Duplex Well)

D18-D60까지 배양하며 성장패턴을 비교하였을때, 3D Duplex well에서는 오가노이드의 크기 분산이 낮고 균일하게 성장하여, variability가 적었습니다.  

또한 oval 형태 및 organoid border를 잘 유지하였습니다.