[NETRI] 3D 오가노이드 제작을 위한 Duplex Organoid-on-chip | 고마바이오텍

특징 

• NETRI Duplex well 3D OoC는 Human brain cell 조직을 대체하여 약물의 대용량 스크리닝이나 뇌독성 평가에 이용되는 Cerebral organoid를 제작하기 위한 미세유체칩 입니다. 
• 기존의 24well plate와는 달리, cell과 media 처리 공간을 구분함으로써, Cerebral organoid가 균일하고 일정한 크기로 성장하고, necrotic core의 생성을 막아, 재현성있는 결과를 제공합니다. 

Duplex Well 포맷  

• Cell을 seeding하는 open well과 media를 처리하는 large channel로 구성되어 있고, 하단의 porous membrane을 통해 media가 cell에 공급됩니다. 
• Large channel을 통해 media 공급과 제거가 용이합니다. 

Brain Organoid-On-Chip 프로토콜 

• D0 : hiPSC로부터 Embryoid Body (EB) 생성
  
• D2 : EB를 회수하여 dorsal forebrain으로 분화 
• D18 : NETRI 3D Duplex Well에 처리
• D60 : 배양 완료. RNA expression level 확인됨. 세포구조 조직 개선
  
• 최대 D120까지 viability와 morphology 유지

 실험 결과

D18-D60까지 배양하며 성장패턴을 비교하였을때, 3D Duplex well에서는 오가노이드의 크기 분산이 낮고 균일하게 성장하여, variability가 적었습니다.  

또한 oval 형태 및 organoid border를 잘 유지하였습니다. 

Figure 1. Cerebral organoid sizes and growth evolutions from D+18 until D+60 of culture, for on-chip organoids and control organoids cultured in 24-well plates. On-chip organoids exhibit more reproducible surface areas (24-well plate: n=9; Duplex Well: n=27).

• Lower size dispersions for organoids on-chip compared with organoids cultured in 24-well plates reduced variability 
• Smaller average organoid sizes on-chip could be due to the culture in a constraint environment
• Observed with two hiPSCs lines

Vanilin과 Biphenyl-2-ylamine을 이용하여 신경독성 평가에 이용될 수 있음을 확인하였습니다.  

관련 자료 

• HUMAN BRAIN ORGANOID ON CHIP PLATFORM TO IMPROVE ORGANOID REPRODUCIBILITY AND SCALABILITY FOR PHARMACEUTICAL STUDIES