유전자 클로닝 | GenBuilder™ DNA Cloning Kit | 고마바이오텍

특징

• DNA Assembly 기술을 이용하여 최대 12개의 DNA fragment를 cloning 합니다. 
  
• 8kb 이상의 긴 DNA fragment, unpurified PCR 산물, single stranded DNA insert의 cloning에 효과적입니다. 
• Multiple cloning에 유용합니다.
  
• 15분 안에 DNA assembly를 완성할 수 있습니다.
  
• Kit 구성 :  GenBuilder 2X Master Mix, Positive Control

적용

• single/multi-gene의 1-step 클로닝을 이용한 벡터 제작
• ssDNA를 이용한 gene mutation (addition, deletion and point mutation of base pairs)
• ssDNA를 bridge로 사용한 Codon saturation mutagenesis
  
• High throughput cloning 등

실험 과정

1. DNA 조각과 assembly용 linearized vector 준비

2. GenBuilder™ master mix에 DNA 조각과 linearized vector를 넣어 잘 혼합한 뒤 50°C 에서 15분간 배양

3. Assembly를 competent cell로 transformation 하여 selective medium에 plating 후 colony 획득 

실험 결과

그림 1. 다양한 DNA Assembly 방식을 이용한하여 5 개의 PCR 조각을 vector에 cloning. 0.7 kb부터 1.6kb 길이의 PCR 조각을 single-step 반응으로 pUC57에 assemble한 결과. 타사의 제품에 비해 GenBuilder가 가장 높은 cloning efficiency를 보여줌.

그림2. DNA fragments의 수를 증가하며 Assembly efficiency 비교. ​

그림 3. GenBuilder^TM과 GenBuilder^TM Plus kit를 이용하여 다양한 수의 DNA fragments assembly 획득

그림 4. DNA insert의 overlap base pair 길이에 의한 cloning efficiency 비교

종류