[R&D Systems] Fluorokines | 형광염료가 결합된 활성 단백질 | 고마바이오텍

특징 

• 형광 라벨이 부착된 재조합 단백질로, 세포 표면의 수용체와 직접 결합하는 리간드 역할을 하여, 항체 없이 직접 타겟에 결합하면서 형광신호를 발생시킵니다.  따라서 더 간단하고, 비특이적 결합도 줄고, 실험 시간이 짧아집니다.
• CAR-T/NK 세포, 면역관문 수용체 세포, SARS‑CoV‑2-관련 cell interaction 분석 등에서 유용하게 사용됩니다.
• Alexa Fluor® 형광염료를 사용하여 강한 형광 신호와 뛰어난 광안정성(photostability)을 제공합니다.
• 라벨링 전 단백질의 기능이 유지되며, lot 간 차이 없이 일관된 품질을 보장합니다.

주요 제품

▒ CAR-T or CAR-NK Cell Detection을 위한 Fluorokines

▒ Immune Checkpoint Ligands에 대한 Fluorokines 

▒ SARS-CoV-2 Spike Protein에 대한 Fluorokines

데이터

CD19‑CAR T 세포를 검출하기 위해 두 가지 방법을 비교한 실험에서, 형광이 표지된 recombinant human CD19 단백질(Atto 647N Fluorokine)과 anti-idiotype 항체(FMC63 scFv)를 사용한 결과가 유사하다는 것이 확인되었습니다. 유전자 편집을 통해 CD19-CAR을 도입한 T 세포들은, flow cytometry를 이용하여 CAR의 발현 여부를 분석하였습니다. 이를 위해 하나의 그룹은 Atto 647N 형광염료가 결합된 재조합 CD19 Fc 단백질(#ATM9269)을 사용해 염색하였고, 다른 그룹은 Biotin이 결합된 단일클론 anti-FMC63 항체를 이용한 뒤, PE로 표지된 streptavidin을 처리하는 방식으로 염색하였습니다. 

그 결과, 두 방법 모두 CD19‑CAR을 효과적으로 검출했으며, 염색 효율은 서로 유사한 수준이었습니다. 이는 형광 표지된 CD19 단백질을 이용한 직접 염색 방식이, 전통적인 항체 기반의 간접 염색 방식에 비해 간단하면서도 충분히 신뢰할 수 있는 대안이 될 수 있음을 보여줍니다. 

Alexa Fluor®로 표지된 스파이크 단백질을 이용한 HEK293 세포의 ACE-2 발현 검출

HEK293 세포에 인간 ACE-2 유전자를 형질도입한 후, 이 세포들을 두 가지 조건으로 처리하였습니다. (A) 조건에서는 Alexa Fluor® 488 형광염료가 결합된 His-tag 스파이크 단백질(Recombinant SARS-CoV-2 Spike [GCN4-IZ], #AFG10561)을 1 µg/mL 농도로(100 µL/well) 처리하여 염색하였고, (B) 조건에서는 염색을 하지 않은 세포(unstained)를 대조군으로 사용하였습니다. 그 결과, 형광 스파이크 단백질로 염색한 세포군에서는 거의 모든 세포가 ACE-2 양성으로 나타났으며, 이는 염색하지 않은 대조군에 비해 뚜렷하게 높은 ACE-2 발현을 보여주었습니다. 즉, 형광 표지된 스파이크 단백질을 통해 ACE-2 발현을 효과적으로 검출할 수 있음이 입증되었습니다.