1. HepaRG는 어떤 세포인가요?
HepaRG cells은 human hepatocellular carcinoma cells을 이용하여 만든 세포주입니다. Primary human hepatocytes와 동등한 기능과 활성을 발현함으로써, 약물의 흡수, 대사 및 신약 후보물질의 성향을 연구하는데에 도움을 드립니다.
2. HepaRG cells의 origin은 무엇인가요?
HepaRG cell line은 만성 C형 간염 및 간암을 앓고 있는 여성 환자의 종양세포로부터 수립되었으며, HCV protein을 발현하거나 HCV genome의 일부를 포함하고 있지 않음이 확인되었습니다. HepaRG cells을 낮은 밀도로 계대배양 시, 복구가 가능하고 hepatocytes와 biliary epithelial cells 모두로 분화할 수 있기 때문에 progenitor cells로 간주되어 집니다.
3. HepaRG cell을 배양시켜 계속 사용할 수 있나요?
HPR116은 Ready-to-Use로 바로 사용이 가능한 일회용 (Single use assay) 세포이며 계대배양이 되지 않습니다.
HPR101은 분화되지 않은 cell로 계대배양하여 이용할 수 있습니다. (아카데믹과 연구용으로만 MTA 협약을 거쳐 제공됩니다.)
4. HepaRG가 Primary human hepatocytes 또는 HepG2 cells과 다른점은 무엇인가요?
대부분의 Primary human hepatocyte는 성장 능력이 낮고 수명이 짧아 공급이 제한적입니다. 심지어 몇 일 간의 배양만으로도 자신만의 차별화된 기능을 잃어 버리게 됩니다. 따라서 세포 회수방법 및 환경상태에 따라 그 기능이 천차만별하여 균일한 결과를 제공하기 어려운 반면, HepaRG는 functional activity를 유지하므로 보다 안정적으로 실험을 진행할 수 있습니다. HepG2 cells의 경우, metabolic activity의 결여 및 uptake transporters 중 influx transporter가 발현이 되지 않아 약물의 효능 관찰이 어려워 적절한 hepatotoxicity model이 될 수 없습니다. 그러나 HepaRG cells은 efflux transporter 뿐만아니라 influx transporter 발현이 가능하고, 완벽한 metabolic activity를 가지기 때문에 신뢰성 있는 toxicity 결과를 얻으실 수 있습니다.
5. CYP Induction이 가능한가요?
Cytochrome P450s (CYPs)는 총 약물 대사의 75%를 차지합니다. 약물은 enzyme inhibition에 의해 CYP 활성이 저하되거나, enzyme inductuon에 의해 CYP 활성이 증가될 수 있습니다. CYP activity의 변화는 약물의 대사 등에 영향을 미칠 수 있으므로 화합물(신약) 또는 그의 대사산물에 의한 inhibition 또는 induction 수준을 측정하는 것은 약물 대사에 매우 중요합니다. HepaRG cells은 Cytochrome p450s 뿐만 아니라 CYP 발현과 관련한 nuclear receptor, transporter 등 단백질의 발현이 가능합니다.
• Cytochrome p450
• CYP1A2, CYP2B6, CYP2C9, CYP2E13A4
• Nuclear receptors (CAR, PXR) at levels consistent with primary hepatocytes
• >Phase 2 enzymes
• Apical and canicular ABC transporters
• Basolateral solute carrier transporters
• Albumin
• Hepatoglobin
• Aldose B
6. 어떤 종류의 Media와 함께 사용하나요?
기본 Base medium은 Williams’ Medium E (WEM), Ultraglutamine 또는 GlutaMAX™ I을 사용하고, 실험 용도에 따라 아래의 전용 medium supplement를 선택하여 사용합니다.
• 기본 supplement : HepaRG™ Thawing/Plating Medium Supplement
• Metabolism 연구 : HepaRG™ Culture Medium Supplement
• Induction 연구 : HepaRG™ Induction Medium Supplement / HepaRG™ Serum Free Induction Medium Supplement
• Toxicity 연구 : HepaRG™ Tox Medium Supplement
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