렌티바이러스 정량 | Lentivirus Titer & Quantitation Kits | 고마바이오텍

특징

• 렌티바이러스의 효율적인 발현을 위해 바이러스의 양(Titer)을 정확히 정량하는 것은 매우 중요합니다. 바이러스가 제대로 만들어졌는지, 세포 하나당 몇 개의 유전자가 들어가는지 제어(Copy number control)하려면 감염 실험 전에 반드시 정확한 타이터를 알아야 합니다.
• 렌티바이러스 정량 분석법 3종을 제공합니다.  

주요 제품

• 기존 방식은 세포(HT-1080이나 HeLa)에 바이러스를 감염시킨 뒤 항생제 저항성 Colony를 키워 세는 방식을 이용하여, 결과를 얻기까지 몇 주나 걸린다는 단점이 있습니다. 
• QuickTiter™ HIV p24 ELISA Kit는 Mouse monoclonal antibody가 코팅된 플레이트를 이용해 렌티바이러스의 p24 코어 단백질 양을 ELISA로 정량합니다. 
• Recombinant HIV-1 based lentivirus의 모든 p24 core protein을 측정합니다. 
• 표준 물질(Standard curve)의 흡광도와 비교하여 계산합니다.
• 최소 1 ng/mL의 p24 단백질까지 검출할 수 있으며, 이는 약 10,000-100,000 TU/ml 에 해당합니다. 
• Kit 구성품 : 
• Anti-p24 Antibody Coated Plate
• FITC-Conjugated Anti-p24 Monoclonal Antibody
• HRP-Conjugated Anti-FITC Monoclonal Antibody
• Assay Diluent
• Triton X-100 Solution
• 10X Wash Buffer
• Substrate Solution
• Stop Solution
• Recombinant p24 Standard

GFP 렌티바이러스 상등액(Supernatant)의 p24 Titer

GFP 렌티바이러스 제작용 벡터(construct)를 packaging mix와 함께 293AD 세포주(Cat.# AD-100)에 cotransfection했습니다. 형질전환 48시간 후에 바이러스가 포함된 배양액을 수확했습니다. 이 GFP 렌티바이러스 상등액을 HEK293 세포에 3일 동안 감염시킨 결과, GFP 발현이 확인되었습니다. 10배 희석한(1:10) 렌티바이러스 상등액 내의 p24 단백질 수치는 분석 가이드라인에 기재된 대로 측정되었습니다.

▒ Lentivirus-Associated p24 ELISA 방식 : QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit (#VPK-107)

• 이 키트는 기존 p24 ELISA의 치명적인 단점인 'Free p24까지 측정되는 문제'를 특허 기술로 해결했습니다. 
• 특허받은 ViraBind™ 시약을 샘플에 넣으면, 이 시약이 배양액 속의 Free p24는 그냥 내버려 두고 '바이러스 입자에 결합된 p24'하고만 선택적으로 복합체를 이룹니다. 그 후 ELISA를 통해 이 복합체의 양만 정확하게 측정합니다.
• 최소 1 ng/mL의 HIV p24까지 잡아낼 수 있으며, 이는 대략 10,000 - 100,000 TU/mL 수준의 렌티바이러스 샘플을 정량할 수 있는 고감도 성능입니다.
• 바이러스가 포함된 세포 배양 상등액(정제 전)이나 정제된 바이러스 샘플 모두에서, 진짜 바이러스의 양만 쉽고 빠르게 정량할 수 있는 효율적인 시스템입니다.
• Kit 구성품 : 
• ViraBind™ Lentivirus Reagent A
• ViraBind™ Lentivirus Reagent B
• Sample Diluent
• Anti-p24 Antibody Coated Plate
• FITC-Conjugated Anti-p24 Monoclonal Antibody
• HRP-Conjugated Anti-FITC Monoclonal Antibody
• Assay Diluent
• 10X Wash Buffer
• Substrate Solution
• Stop Solution
• Recombinant p24 Standard 

GFP 렌티바이러스 상등액(Supernatant)의 바이러스 결합 p24 Titer

GFP 렌티바이러스 제작용 벡터(construct)를 packaging mix와 함께 293LTV 세포주(Cat.# LTV-100)에 cotransfection 했습니다. 형질전환 48시간 후에 바이러스가 포함된 배양액을 수확했습니다. 이 GFP 렌티바이러스 샘플을 HEK293 세포에 3일 동안 감염시킨 결과, GFP 발현이 확인되었습니다. (A: GFP 렌티바이러스 상등액, B: ViraBind™ 침전물). 유리 p24(Free p24)와 바이러스 결합 p24(Virus Associated p24)는 ViraBind™ 렌티바이러스 시약을 통해 분리되었습니다. p24 수치는 분석 가이드라인에 기재된 대로 측정되었습니다.