DNA 염색 시약 | GelRed® & GelGreen® DNA Stain | 고마바이오텍

특징

• GelRed와 GelGreen은 무독성, 비발암원성의 DNA dye 입니다.
  
• 기존의 EtBr이나 SYBR Safe를 대체하여 안전하게 실험하실 수 있습니다. 
• 위험물이 아니기 때문에 별도의 분리수거가 필요없습니다.  
  
• 민감도가 높아 적은 양의 DNA도 성공적으로 detection 합니다.
• precast 및 post-electrophoresis gel staining에 이용됩니다.
• GelRed는 UV transilluminator에서, GelGreen은 UV 및 blue light gel reader에서 사용됩니다.
• gel에서의 밴드 정제, 시퀀싱, 클로닝등 downstream 실험에 이용할 수 있습니다. 
• PAGE GelRed는 acrylamide gel에서 사용할 수 있는 GelRed dye 입니다.
  

파장 범위 

Excitation and emission spectra of GelRed® and GelGreen® with DNA. 

종류 

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실험 데이터

그림1. GelRed 및 GelGreen은 살아있는 세포의 cell membrane을 통과하지 못하기 때문에 안전합니다. HeLa cell을 1x SYBR Safe, GelGreen, GelRed와 함께 배양한 후 이미지를 촬영한 결과 SYBR Safe가 신속하게 세포로 침투하여 핵을 염색한 반면, GelGreen과 GelRed는 세포막을 통과하지 못하여 염색되지 않았습니다.  

그림 2. 1% TBE agarose에서 각 dye를 이용하여 염색한 결과, GelRed 및 GelGreen은 EtBr이나 SYBR Safe보다 민감한 결과를 보여주었습니다. 

그림3. Salmonella Strain TA98의 Ames Test를 통해 GelRed와 GelGreen의 낮은 세포독성 결과를 확인하였습니다.  

사용법

Precast agarose gels 프로토콜

1. GelRed나 GelGreen을 1X를 아가로즈에 넣는다. (예, 10,000X GelRed/GelGreen 5ul를 50ml agarose에 넣는다.)
2. Gel을 만들고 샘플을 전개한다. DNA나 ladder는 50-200ng을, PCR product의 경우 2-5ul를 로딩한다. DNA양을 알수 없는 경우 EtBr gel 사용시 로딩하는 양의 1/2-1/3정도를 로딩한다. 더 많은 양의 DNA를 전개해야 한다면 post-staining protocol을 이용하도록 한다. 
3. GelRed 사용시에는 UV light box에서 이미징한다. (EtBr filter사용) GelGreen사용시에는 UV light box (SYBR Green filter 사용), 혹은 blue light illuminator에서 이미징한다. 

Post-staining agarose/acrylamide gels 프로토콜 

1. DNA dye가 없는 gel에서 샘플을 전개한다. 
2. GelRed나 GelGreen을 3X를 water에 넣는다. (예, 10,000X GelRed/GelGreen 15ul를 50ml water에 넣는다.)
3. GelRed/GelGreen이 gel을 덮을수 있도록 충분한 양을 이용하고, 30분간 rocking하면서 incubation한다.
4. GelRed 사용시에는 UV light box에서 이미징한다. (EtBr filter사용) GelGreen사용시에는 UV light box (SYBR Green filter 사용), 혹은 blue light illuminator에서 이미징한다. 

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