[R&D Systems] Cultrex Cell Invasion & Angiogenesis Assay Kit

시약 및 기기 상세

[R&D Systems] Cultrex Cell Invasion & Angiogenesis Assay Kit

Maker : R&D SYSTEMS

Cultrex BME를 이용한 Cell Invasion Assay kit와 In Vitro Angiogenesis Assay kit을 소개합니다.

프린트 제품 문의

Cultrex 3D Culture BME Cell Invasion Assay, 96 well (#3500-096-K)

3D culture plate에서 Spheroid를 만들어 Invasion 영향을 3D 차원에서 평가합니다.
특수한 Spheroid Formation Extracellular Matrix와 함께 3-D Culture Qualified 96 Well Spheroid Formation Plate를 사용하여 세포의 응집 또는 Spheroid 형성을 촉진합니다.
Spheroid 형성이 완료되면 Spheroid는 기저막 단백질로 구성된 Invasion 매트릭스에 매립됩니다.
이 매트릭스는 침입 세포가 이동할 수 있는 하이드로젤 네트워크를 형성합니다.
Invasion modulating agent를 시스템에 적용하여 세포 반응에 미치는 영향을 평가할 수 있습니다.
세포 침입은 현미경으로 시각화되며 이미지 분석 소프트웨어를 통해 정량화 할 수 있습니다.
Kit 구성품

Cultrex Spheroid Formation Matrix
3-D Culture Qualified 96 Well Spheroid Formation Plate with Strip Seals
Cultrex Spheroid Invasion Matrix

Cultrex BME를 이용한 세포 침윤 및 이동 분석

MDA-MB-231 유방암 세포는 well당 3,000개씩 low adhesion plate에서 72시간 동안 배양하여 스페로이드를 형성합니다. 이 과정에는 Cultrex 3-D Spheroid Basement Membrane Extract Cell Invasion Assay에 포함된 시약이 사용됩니다. 먼저, 세포는 1X Spheroid Formation Matrix와 함께 배양되어 스페로이드를 형성하고, 이후 형성된 스페로이드는 침윤 매트릭스를 포함하지 않은 조건 또는 Spheroid Invasion Matrix에 임베딩하는 두 가지 조건으로 처리합니다. 하이드로젤이 중합된 후, 각 well에 DMEM 배지와 10% FBS를 첨가하여 96시간 동안 화학주성 반응을 유도합니다. 그 결과, Spheroid Invasion Matrix에 임베딩한 조건에서, 매트릭스를 포함하지 않은 조건에 비해 세포 침윤이 더 활발하게 일어나는 것이 확인됩니다. 이 실험은 Spheroid Invasion Matrix가 세포의 침윤을 효과적으로 촉진함을 보여줍니다.

Cultrex In Vitro Angiogenesis Assay (Tube Formation) (#3470-096-K)

혈관 내피세포(예: HUVEC)는 적절한 환경이 주어지면 스스로 연결되어 그물망 같은 모세혈관 구조(Tube)를 형성하려는 성질이 있습니다. BME는 이 키트의 핵심 성분으로, 세포가 입체적으로 자랄 수 있는 지지대 역할을 합니다. 일반 BME와 달리 성장 인자 함량을 줄여서, 외부에서 넣어주는 후보 물질의 순수한 효과만을 정밀하게 측정합니다. 후보 물질을 처리했을 때, 이 그물망(Tube)이 얼마나 더 촘촘하게 생기는지(촉진), 혹은 끊어지는지(억제)를 현미경으로 관찰합니다.
Endothelial cell (내피세포)는 혈관신생 조절제가 있는 Cultrex BME gel에 접종되고, 혈관신생 반응이 있을 경우 tube network을 형성합니다.
배지에 억제제가 있을 경우, tube network 형성이 불완전하거나 형성되지 않습니다.
Sulforhodamine 101은 세포를 염색하여 형광 현미경으로 Tube 구조를 더 선명하게 볼 수 있게 돕습니다.
Calcein AM은 살아있는 내피세포만을 선택적으로 염색하여 분석의 정확도를 높입니다.
Kit 구성품

Cell Staining Solution
Cultrex BME, reduced growth factor without phenol red
Sulforaphane
Calcein AM

HUVEC에서의 BME 사용 결과

HUVEC은 수확한 뒤 세포 수를 계수하고, 혈청이나 혈관신생 인자가 포함되지 않은 Endothelial Cell Base Media 또는 HUVEC의 성장을 지원하는 모든 보충제와 성장 인자가 포함된 Endothelial Cell Growth Media에 희석합니다. 트립신 처리 후 수확한 HUVEC는 well당 10⁴개씩 분주하여, 젤화된 Cultrex RGF BME 위에 접종하고 37℃, 5% CO₂ 조건에서 4시간 동안 배양합니다. 이후, 위상차 현미경으로 관찰한 대표 이미지를 통해, 혈관신생 인자가 포함되지 않은 Endothelial Cell Base Media에서의 HUVEC 형태(A), 성장 인자가 포함된 Endothelial Cell Growth Media에서의 형태(B), 그리고 5 μM의 sulforaphane을 함께 처리한 조건(C)의 세포 형태를 10배 배율로 확인합니다.

주문정보

주문정보 - Cat No, PRODUCT, SIZE, 수량 등 항목으로 구성되어있습니다.
	Product	Cat.No.	Size	Maker	Qty	Data Sheet	MSDS
	Cultrex 3D Culture BME Cell Invasion Assay, 96 well	3500-096-K	1 kit	R&D SYSTEMS
	Cultrex In Vitro Angiogenesis Assay (Tube Formation)	3470-096-K	1 kit	R&D SYSTEMS