마이코플라즈마 신속검출 키트 | Myco-Visible Mycoplasma Rapid Test Kit | 고마바이오텍

특징 

• 마이코플라즈마 오염을 1시간 이내에 신속하게 확인할 수 있는 kit 입니다.
• 모든 Mollicutes의 마이코플라즈마 유전체의 고유한 영역을 표적 및 증폭함으로써 오염을 감지합니다. 

• 10 CFU/mL 또는 반응당 10 fg의 마이코플라즈마 유전체 DNA까지 검출 가능합니다. 
• 특이도 시험에서 다른 박테리아, 진균 및 포유류 DNA와의 교차 반응은 나타나지 않았습니다. 
• 실험 방법은 아주 간단하여 특별한 기술이나 실험 장비를 필요로 하지 않습니다.
• 양성 결과는 샘플 로딩 후 5분 이내에 신속검사키트에서 확인하실 수 있습니다.
• LAMP 키트(#093050601)와 같은 원리이나 마지막 확인과정이 color 변화가 아닌 strip 방식을 이용합니다. 
  

구성  

• Reaction Beads 
• Sample Buffer
• Primer Mix
• Nuclease-free Water 
• Positive Control 
• Running Buffer
• Detection Device

실험 과정

Step 1. 샘플준비 

1ml의 세포배양액 > 20,000g 2분간 원심분리 > sample buffer에서 resuspension > 95도 5분간 heating > 14,000g 2분간 원심분리 > 상층액 수집

Step 2. Reaction mixture 준비

샘플과 Primer Mix, Nuclease-free water를 튜브에 넣고 파이펫팅으로 잘 혼합

Step 3. Mycoplasma 확인

2번에서 준비된 혼합액을 70도에서 30분간 반응 > Detection device의 sample well에 3방울을 떨어뜨림 > 5분후 밴드 패턴 확인

실험 결과

 그림 1:  Myco-Visible Mycoplasma Rapid Test Kit의 분석 민감도 테스트(analytical sensitivity test). 7가지 마이코플라즈마 균주 모두 100 CFU/mL 및 10 CFU/mL 농도에서 테스트되었으며, 모든 샘플에서 두 농도 모두 양성 결과가 나타났습니다. 음성 대조군은 다른 샘플과 함께 반응한 template가 포함되지 않은 reaction mix (nuclease-free water)입니다.

그림 2:  Myco-Visible Mycoplasma Rapid Test Kit의 특이성 테스트(specificity test).  상단 행에서는 마이코플라즈마와 유전적으로 관련된 10가지 박테리아 종에서 정제된 gDNA가 1 x 10⁵ copies/reaction 농도로 테스트되었습니다. 하단 행에서는 사람, 생쥐, 효모(15,16) 및 오염되지 않은 세포 배양(13,14)에서 분리된 gDNA가 테스트되었습니다. 모든 샘플에서 음성 결과가 나타나 교차 반응이 없음을 확인했습니다.