Tyramide Signal Amplification (TSA) Kits | 고마바이오텍

​Tyramide signal amplification (TSA)란? 

형광 염료가 표지된 항체를 사용하는 기존의 방법과는 달리, TSA는 Tyramide의 활성화를 촉매하는 HRP(horseradish peroxidase)를 운반하는 항체를 사용합니다. HRP는 근처의 tyrosine 잔기에 공유 결합하여 부착됩니다. TSA를 이용하면 IF를 이용하는 것보다 밝은 형광 신호를 얻을 수 있으며, 항체의 cross-reactivity에 영향을 받지 않습니다. 

• 미량의 타겟도 감지할 수 있습니다.
• ICC, IHC 및 FISH와 호환됩니다.
• 기존의 방식의 최대 100배 수준으로 민감합니다.
• 기존의 ICC, IHC 및 FISH와 workflow가 유사합니다.
• 소량의 1차 항체를 사용합니다.
• Multiplex IHC에 효과적입니다. 

Tyramide signal amplification(TSA) system. A cell or tissue sample is labeled with primary and secondary antibody using conventional methods. The horseradish peroxidase, conjugated to the secondary antibody, catalyzes the conversion of labeled tyramide into a reactive radical. The tyramide radical then covalently binds to nearby tyrosine residues, providing high-density labeling.

Tyramide Amplification Kit  

• Tyramide 라벨링을 위한 모든 중요한 시약이 포함되어 있습니다.
• Biotin tyramide 또는 6 종류의 CF Dye tyramide 중 선택할 수 있습니다.
• Goat anti-mouse HRP,  Goat anti-rabbit HRP, Streptavidin-HRP 중에서 선택할 수 있습니다.
• Amplification buffer 및 blocking용 BSA가 포함되어 있습니다.
• Kit 구성품 
• CF® dye or biotin-tyramide stock solution
• 2차 항체 
• BSA for blocking
• Tyramide Amplification Buffer Plus & 30% Hydrogen Peroxide 혹은 Ready-to-Use Tyramide Amplification Buffer

Tyramide Amplification buffer

• Tyramide Amplification Buffer Plus(#22029) : 기존의 #22027에 비해 tyramide signal의 밝기, 특이성, 민감도가 향상된 제품입니다. 
  
• Ready-to-Use Tyramide Amplification Buffer(#22027) : 사용전에 과산화수소를 추가할 필요가 없습니다. 

실험 결과

그림 2. Multiplex tyramide labeling of FFPE tissues. Cytokeratin (pan) was labeled with CF®488A-tyramide (green); Histone H1 was labeled with Cy®3-tyramide (red); ZO1 was labeled with CF®640R-tyramide (magenta).

그림 3. Sequential labeling of formaldehyde-fixed HeLa cells with two Tyramide Amplification Kits. Mitochondria (green) was labeled with rabbit anti-COXIV primary antibody and Tyramide Amplification Kit with HRP goat anti-rabbit IgG and CF®488A-tyramide, followed by peroxidase quenching. Nucleoli (magenta) visualized with mouse anti-cyclin B1 primary antibody and Tyramide Amplification Kit with HRP Goat anti-mouse IgG and CF®568-tyramide. 

그림 4. Staining more targets simultaneously allows detailed studies of tissue architecture. Automated spatial analysis (CytoMAP) of 12-plex CF dye staining of myeloid markers in lymph nodes (LN) reveals myeloid organization.

그림 5. Left panel: Single staining against select targets in a human ovarian tumor by DAB (top) and TSA (bottom). Right panel: Fully automated TSA staining using rabbit primary antibodies and unique dye tyramides allows multiplex staining and distinguishing 5 targets plus DAPI DNA stain. Adapted from (Zhang et al., 2017).

종류

Tyramide Signal Amplification Kits   

Standalone Dye and Hapten Labeled Tyramides