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제품 상세

Antibody

6.5 - 270 kDa 범위를 커버하는 3가지 컬러 밴드를 포함하며,
최대 100%까지의 transfer 효과를 개런티하는 Prestained protein ladder를 소개합니다.

Tyramide signal amplification (TSA)란? 

 

형광 염료가 표지된 항체를 사용하는 기존의 방법과는 달리, TSA는 Tyramide의 활성화를 촉매하는 HRP(horseradish peroxidase)를 운반하는 항체를 사용합니다. HRP는 근처의 tyrosine 잔기에 공유 결합하여 부착됩니다. TSA를 이용하면 IF를 이용하는 것보다 밝은 형광 신호를 얻을 수 있으며, 항체의 cross-reactivity에 영향을 받지 않습니다. 

 

  • 미량의 타겟도 감지할 수 있습니다.
  • ICC, IHC 및 FISH와 호환됩니다.
  • 기존의 방식의 최대 100배 수준으로 민감합니다.
  • 기존의 ICC, IHC 및 FISH와 workflow가 유사합니다.
  • 소량의 1차 항체를 사용합니다.
  • Multiplex IHC에 효과적입니다. 

 

Tyramide signal amplification(TSA) system 원리
Tyramide signal amplification(TSA) system. A cell or tissue sample is labeled with primary and secondary antibody using conventional methods. The horseradish peroxidase, conjugated to the secondary antibody, catalyzes the conversion of labeled tyramide into a reactive radical. The tyramide radical then covalently binds to nearby tyrosine residues, providing high-density labeling.

 

 

 

Tyramide Amplification Kit  

  

  • Tyramide 라벨링을 위한 모든 중요한 시약이 포함되어 있습니다.
  • Biotin tyramide 또는 6 종류의 CF Dye tyramide 중 선택할 수 있습니다.
  • Goat anti-mouse HRP,  Goat anti-rabbit HRP, Streptavidin-HRP 중에서 선택할 수 있습니다.
  • Amplification buffer 및 blocking용 BSA가 포함되어 있습니다.
  • Kit 구성품 
    • CF® dye or biotin-tyramide stock solution
    • 2차 항체 
    • BSA for blocking
    • Tyramide Amplification Buffer Plus & 30% Hydrogen Peroxide 혹은 Ready-to-Use Tyramide Amplification Buffer

 

 

 

Tyramide Amplification buffer

 

  • Tyramide Amplification Buffer Plus(#22029) : 기존의 #22027에 비해 tyramide signal의 밝기, 특이성, 민감도가 향상된 제품입니다. 
  • Ready-to-Use Tyramide Amplification Buffer(#22027) : 사용전에 과산화수소를 추가할 필요가 없습니다. 

 

 

 

실험 결과

 

 Multiplex tyramide labeling of FFPE tissues 

 

그림 2. Multiplex tyramide labeling of FFPE tissues. Cytokeratin (pan) was labeled with CF®488A-tyramide (green); Histone H1 was labeled with Cy®3-tyramide (red); ZO1 was labeled with CF®640R-tyramide (magenta).

 

 Sequential labeling of formaldehyde-fixed HeLa cells with two Tyramide Amplification Kits 

 

그림 3. Sequential labeling of formaldehyde-fixed HeLa cells with two Tyramide Amplification Kits. Mitochondria (green) was labeled with rabbit anti-COXIV primary antibody and Tyramide Amplification Kit with HRP goat anti-rabbit IgG and CF®488A-tyramide, followed by peroxidase quenching. Nucleoli (magenta) visualized with mouse anti-cyclin B1 primary antibody and Tyramide Amplification Kit with HRP Goat anti-mouse IgG and CF®568-tyramide. 

 

Staining more targets simultaneously allows detailed studies of tissue architecture
 

그림 4. Staining more targets simultaneously allows detailed studies of tissue architecture. Automated spatial analysis (CytoMAP) of 12-plex CF dye staining of myeloid markers in lymph nodes (LN) reveals myeloid organization.

 

Fully automated TSA staining
 

그림 5. Left panel: Single staining against select targets in a human ovarian tumor by DAB (top) and TSA (bottom). Right panel: Fully automated TSA staining using rabbit primary antibodies and unique dye tyramides allows multiplex staining and distinguishing 5 targets plus DAPI DNA stain. Adapted from (Zhang et al., 2017).

 

 

 

종류

 

Tyramide Signal Amplification Kits   

Tyramide Label Ex/Em Secondary conjugate Cat. No.
CF®488A 490/515 nm Goat anti-mouse HRP 33000
Goat anti-rabbit HRP 33001
Streptavidin HRP 33002
CF®543 541/560 nm Goat anti-mouse HRP 33003
Goat anti-rabbit HRP 33004
Streptavidin HRP 33005
CF®568 562/583 nm Goat anti-mouse HRP 33006
Goat anti-rabbit HRP 33007
Streptavidin HRP 33008
CF®594 593/614 nm Goat anti-mouse HRP 33009
Goat anti-rabbit HRP 33010
Streptavidin HRP 33011
CF®640R 642/662 nm Goat anti-mouse HRP 33012
Goat anti-rabbit HRP 33013
Streptavidin HRP 33014
CF®680R 680/701 nm Goat anti-mouse HRP 33015
Goat anti-rabbit HRP 33016
Streptavidin HRP 33017
Biotin-XX N/A Goat anti-mouse HRP 33018
Goat anti-rabbit HRP 33019
Streptavidin HRP 33020

 

Standalone Dye and Hapten Labeled Tyramides   

Tyramide label Ex/Em Size Cat. No.
CF®350 347/448 nm 0.5 mg 92170
CF®405L 395/545 nm 0.5 mg 92198
CF®405S 404/431 nm 0.5 mg 92197
CF®405M 408/452 nm 0.5 mg 96057
CF®430 426/498 nm 0.5 mg 96053
CF®488A 490/515 nm 0.5 mg 92171
FITC 492/514 nm 0.5 mg 96018
CF®514 516/548 nm 0.5 mg 92199
CF®532 527/558 nm 0.5 mg 96066
CF®543 541/560 nm 0.5 mg 92172
CF®550R 551/577 nm 0.5 mg 96077
CF®555 555/565 nm 0.5 mg 96021
Cyanine 555 555/565 nm 0.5 mg 96020
CF®568 562/583 nm 0.5 mg 92173
CF®583R 586/609 nm 0.5 mg 96085
CF®594 593/614 nm 0.5 mg 92174
CF®620R 617/639 nm 0.5 mg 92194
CF®640R 642/662 nm 0.5 mg 92175
CF®647 650/665 nm 0.5 mg 96022
CF®660R 663/682 nm 0.5 mg 92195
CF®680R 680/701 nm 0.5 mg 92196
CF®750 755/779 nm 0.5 mg 96052
CF®754 748/793 nm 0.5 mg 96090
Biotin-XX N/A 0.5 mg 92176
DNP N/A 0.5 mg 96019

 

 

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0.5 ml Elite Pre-stained Protein Ladder (2 x 0.25 ml) PAL-EPL-500 0.5ml 500
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