단백질 접힘 조건 스크리닝 | Protein Refolding Screening

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시약 및 기기 상세

단백질 접힘 조건 스크리닝 | Protein Refolding Screening

Maker : PROTEIN ARK

단백질 접힘 조건을 스크리닝하기 위한 Protein refolding kit와 단백질접힘에 영향을 주는 Cyclodextrin, detergent screening kit를 소개합니다.

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특징

Protein Ark의 Protein Refolding Reagents 섹션은 대장균(E. coli) 등을 이용한 단백질 발현 시 발생하는 봉입체(Inclusion Bodies) 문제를 해결하기 위한 제품들로 구성되어 있습니다.

불용성 상태로 뭉쳐서 활성이 없는 단백질을 다시 본래의 입체 구조로 되돌려(Refolding) 활성을 되찾게 해주는 핵심 시약들입니다.

종류

▒ QuickFold™ Protein Refolding Kit (#MD1-28)

대장균 발현 시 형성된 봉입체(Inclusion Body)로부터 활성 상태의 단백질을 회복시키기 위한 최적의 조건을 찾는 스크리닝 키트입니다.
단백질 리폴딩은 단백질마다 최적 조건이 매우 다르기 때문에 일일이 실험하기 까다로운데, 이 키트는 매트릭스(Matrix) 설계를 통해 이 과정을 획기적으로 단축해 줍니다.
복잡한 계산 없이 제공된 프로토콜에 따라 매트릭스 테스트를 수행하면 됩니다.
다양한 종류의 재조합 단백질에 적용 가능하며, 특히 구조가 복잡하거나 이황화 결합이 필요한 단백질에 효과적입니다.
적은 양의 단백질 샘플로도 수십 가지 조건을 동시에 테스트할 수 있어 귀중한 샘플을 아낄 수 있습니다.

진행과정

Denaturation (변성): Urea나 Guanidine HCl을 사용해 봉입체 상태의 단백질을 완전히 녹입니다.
Screening (스크리닝): QuickFold™ 키트에 포함된 다양한 리폴딩 버퍼들에 변성된 단백질을 소량씩 첨가(Dilution)합니다.
Observation (관찰): 어떤 버퍼에서 단백질이 침전되지 않고 투명하게 유지되는지, 혹은 활성을 나타내는지 확인합니다.
Scale-up (스케일업): 찾아낸 최적의 조건을 바탕으로 대량 정제 공정에 적용합니다.

구성품

DTT
Glutathione, reduced (GSH)
Glutathione, oxidized (GSSH)
Refolding Buffer 1 - 15

QuickFold™ Protein Refolding Buffer Formulation
Component	Formulation after Preparation (Addition of DTT, GSH, and GSSH)	DTT	GSH/GSSH
Buffer 1	50 mM MES pH 6.0, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.75 M Guanidine HCl, 0.5% Triton X-100, 0.1 mM DTT	O
Buffer 2	50 mM MES pH 6.0, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.5 M arginine, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 3	50 mM MES pH 6.0, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.4 M sucrose, 0.75 M Guanidine HCl, 0.5% Triton X-100, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM DTT	O
Buffer 4	50 mM MES pH 6.0, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.5 M arginine, 0.5% Triton X-100, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 5	50 mM MES pH 6.0, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.4 M sucrose, 0.75 M Guanidine HCl, 0.1 mM DTT	O
Buffer 6	50 mM MES pH 6.0, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.5 M arginine, 0.4 M sucrose, 0.5% Triton X-100, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 7	50 mM MES pH 6.0, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.75 M Guanidine HCl, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM DTT	O
Buffer 8	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.4 M sucrose, 0.5% Triton X-100, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 9	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.5 M arginine, 0.75 M Guanidine HCl, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM DTT	O
Buffer 10	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.5 M arginine, 0.4 M sucrose, 0.75 M Guanidine HCl, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 11	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 9.6 mM NaCl, 0.4 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.5% Triton X-100, 0.1 mM DTT	O
Buffer 12	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 13	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.5 M arginine, 0.75 M Guanidine HCl, 0.5% Triton X-100, 0.1 mM DTT	O
Buffer 14	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.5 M arginine, 0.4 M sucrose, 0.75 M Guanidine HCl, 0.5% Triton X-100, 0.05% polyethylene glycol 3,550, 0.1 mM GSH, 0.01 mM GSSH		O
Buffer 15	50 mM Tris-Cl pH 8.5, 240 mM NaCl, 10 mM KCl, 2 mM MgC , 2 mM CaC , 0.4 M sucrose, 0.1 mM DTT	O

▒ Cyclodextrin Kit (#MD12-602)

단백질의 올바른 구조 형성(Refolding)을 돕고 보관 효율을 높이는 데 특화된 도구입니다.
단백질이 서로 뭉쳐서 망가지는(Aggregation) 현상을 막고, 변성이나 기능 상실로부터 보호합니다.
단백질 리폴딩 과정에서 사용된 계면활성제와 강력하게 결합하여 이를 단백질로부터 분리해 줍니다. 이 과정이 단백질의 정상적인 구조 회복을 촉진합니다.
고유의 원뿔형 분자 구조를 이용해 단백질이 제 기능을 찾을 수 있는 최적의 환경을 제공합니다.
가장 널리 쓰이는 3가지 타입의 사이클로덱스트린이 포함되어 있어, 특정 단백질에 가장 적합한 조건을 신속하게 테스트할 수 있습니다.

구성품

β-cyclodextrin
methyl-β-cyclodextrin
α-cyclodextrin

▒ Detergent Screening Kit (#MD12-601)

단백질 리폴딩에 가장 효과적이라고 검증된 6가지 계면활성제가 각각 10ml씩 포함되어 있습니다.
특정 단백질에 가장 잘 맞는 계면활성제가 무엇인지 빠르게 테스트할 수 있는 스크리닝 형식을 제공합니다.
단백질마다 최적의 반응 환경이 다르기 때문에, 시행착오를 줄여 최상의 결과를 내도록 돕습니다.
이 키트로 최적의 계면활성제를 찾아 단백질 응집을 막은 후, Cyclodextrin Kit를 사용해 해당 계면활성제를 다시 제거하는 방식으로 연계하여 사용합니다.

구성품

Triton X-100
Tween 80
CTAB
Zwittergent 3-14
TTAB
POE(10)L

주문정보

주문정보 - Cat No, PRODUCT, SIZE, 수량 등 항목으로 구성되어있습니다.
Product	Cat.No.	Size	Maker
Cyclodextrin Kit	MD12-602	1 kit	PROTEIN ARK
Detergent Screening Kit	MD12-601	1 kit	PROTEIN ARK
QuickFold™ Protein Refolding Kit	MD1-28	1 kit	PROTEIN ARK
Refolding Buffers - 1,000 ml	MD12-613	1 l	PROTEIN ARK
Refolding Buffers - 500 ml	MD12-612	500 ml	PROTEIN ARK