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항체치료제 ADCC Assay 서비스

Maker : EUROFINS DISCOVERY

항체 면역항암제의 효능을 평가하기 위한 ADCC분석서비스를 제공합니다.

특징   

 

  • ADCC(Antibody-dependant-cell mediated cytotoxicity, 항체 의존 세포 매개 세포 독성)는 암이나 바이러스가 감염된 타겟 세포를 용해하기 위한 면역세포의 활성화를 유도하는 세포 매개 면역 방어 메커니즘입니다.
  • 항체가 암세포에 결합하여 NK 세포를 활성화시키고, 이로 인해 암세포가 사멸됩니다. 
  • Anti-HER2 ADCC assay (#300230-1)의 경우, BT-474 표적 세포와 PBMC effector cells을 이용하여 타겟 세포에 대한 cytotoxicity 를 형광으로 측정합니다. 공여자 의존성 변이의 영향을 줄이기 위해 3명의 donor로부터 얻은 PBMC를 이용하며, 검증된 Anti-HER2 Drug인 Trastuzumab를  control로 사용합니다. 
  • 다양한 표적 및 effector cell을 이용한 맞춤형 ADCC 분석을 개발해 드립니다.


ADCC 원리




데이터


Figure 1. Flow cytometry assessment of HER2 surface expression on three breast cancer cell lines. 
MDA-MB-231, MCF-7 and BT-474 cells were thawed and stained with either anti-Her2-PE antibody or isotype control for 30 min followed by washing with 0.2% BSA in PBS. The HER2 surface expression was evaluated from 10,000 cells/sample by flow cytometry. BT-474 cells have a high expression level for HER2 which makes them an ideal target cell.




Figure 2. Cellular cytotoxicity assays enable efficacy comparisons of trastuzumab and a biosimilar. 
Specific cytotoxicity is determined from percent cytotoxicity measured from an antibody of interest and an isotype matched  control. Percent Cytotoxicity is calculated as: Cytotoxicity % = 100 x (1-(A-C)/ (D-C)) where A = Fluorescence intensity of test compound or reference treated  group, C = Fluorescence intensity of medium only, D = Fluorescence intensity of target cell (BT-474) only.




Figure 3. Specific anti-HER2 antibody-dependent cellular cytotoxicity in BT-474 cells. 
Fluorescence intensity decreased by ≥ 20% relative to 1 μg/ml hIgG1 isotype control indicates specific ADCC activity. Percent ADCC increases, up to a point, with increasing concentrations of trastuzumab, but not IgG. Antibodies were preincubated with Calcein AM-stained target cells (1 x 104 cells/well) for 30 min, followed by addition of PBMC effector cells. Live cell images were acquired using the ImageXpress Micro Confocal Image System; target cell cytotoxicity was quantified by fluorescence intensity. ADCC is calculated as: 100 x (1-(A-C)/ (B-C)) where A = Fluorescence intensity of test compound or reference treated group, B = Fluorescence intensity of 1 μg/ml human IgG1 treated group, C = Fluorescence intensity of medium only.


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      항체치료제 특성화 분석서비스 (ADCC Assay) 899313 . EUROFINS DISCOVERY
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      EUROFINS DISCOVERY
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      항체치료제 특성화 분석서비스 (ADCC Assay)
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