1. DSS는 무엇인가요?
Dextran sulfate sodium salt (DSS)는 sulfate를 가진 polysaccharide derivative로 생물의학 및 임상연구 등 분자량에 따라 다양한 용도로 사용되어지고 있습니다. DSS의 한가지 중요한 특성은 음수로 투여할 때 mouse 와 rat에서 대장염을 유발하는 것입니다. DSS는 대장에 있는 medium-chain-length fatty acids와 결합하여, 장 염증을 유발하게 됩니다.
2. DSS 처리 후 초기 단계 중 언제 상피 장벽이 손상이 되는지 확인하기 위해서 어느 시점에 테스트를 하는 것이 좋은가요?
일반적으로 이틀이면 상피 장벽 파괴를 일으키며, 3일차, 5일차, 7일차에 확인할 수 있습니다. 병리학적 검사를 수행하는 것을 권장합니다.
3. 배치마다 DSS의 농도가 다른 이유는 무엇인가요?
DSS는 평균 분자량을 가진 dextran polymer입니다. 배치 간 분자량에 차이가 있으며, 분자량은 장염 모델에 영향을 미칩니다. 일반적으로 DSS 배치는 비교적 안정적이지만 일부 배치 간에는 큰
차이가 있습니다. 따라서 고객이 실험 요구 조건에 맞춰 동일한 배치를 충분한 수량을 구매하거나 배치가
바뀔 때 사전 실험을 수행하는 것을 권장합니다.
4. DSS 처리된 생쥐의 3%에서 3일후 유의한 체중 감소가 일어나지 않았습니다. 왜 그럴까요?
일부 동물들에서 반응시간이 늦은 것이 일반적이고, 어떤
동물은 DSS를 마신 후 5일 후에 체중이 감소하기도 합니다. 7일 후에도 증상이 없다면, 실험을 반복하고 섭취하는 DSS의 농도를 0.5-1% 정도 증가하는 것을 권장합니다.
5. 동일한 DSS 배치와 동일한 strain의 쥐를 사용하였음에도 다른 실험실에서 DSS 농도가 다른 것은 무엇 때문인가요?
DSS 모델링에 영향을 미치는 요인은 많으며,
그 중 번식 환경도 큰 영향을 미칩니다.
6. DSS 모델링 후
장출혈이 발생하는 것은 정상인가요?
과도한 DSS 섭취로 인해 장출혈이 발생할
수 있습니다. 경미한 장출혈은 유의한 영향은 없습니다. 과도한
장출혈이 발생한다면 DSS 농도를 낮추는 것을 권장합니다.
7. DSS 섭취 후
체중 감소는 분명했지만 병리학적 절개의 HE 염색에서 염증이 관찰되지 않았습니다. 왜 그럴까요?
특정 역치에 도달할 정도의 DSS를 마셔야지만
성공적으로 장염을 유발할 수 있습니다. 만약 역치에 도달하지 못했다면,
체중 감소는 나타나지만, 병리학적으로는 염증이 나타나지 않을 것입니다.
8. 만성 장염 모델의 두 번째
주기에서 동일한 농도의 DSS를 사용해도 왜 증상이 덜 나타나는 걸까요?
DSS는 시간이 흐름에 따라 동물에게서 내성이 생기므로, 두번째 주기에서는 증상이 정상으로 감소합니다.
9. DSS 유도 생쥐의
분변 샘플에서 DNA를 추출하였고, 결장조직에서 RNA를 추출하였는데, DSS 잔류물이 downstream
PCR을 억제할 수 있을까요?
Spermine은
DSS에 의한 PCR 억제 효과를 제거합니다. (출처 : Journal of Microbiological Methods, 2018 Jan, 144:1-7)
10. Gavage (위관 영양) 모델링은 어떻게 진행해야 하나요?
추가 식수 없이 매일 오전 10시, 오후2시, 오후 6시에 위에 DSS 2% 용액을 위에 주입합니다. 매일 마지막 위관 영양 후 혼합 과립 사료를 전량 공급하고, 다음 날
오전 8시에 사료를 회수합니다. 모델링 주기는 9일 입니다. (출처 : A
comparative study of dextran sodium sulfate free drinking and quantitative
gavage induced acute colitis model in mice, gastroenterology 2009,14 (1), 27-30)
11. 장염 유발에 Babl/C 생쥐와 C57 생쥐의 차이가 있나요?
네, 차이가 있습니다. C57 생쥐는 좀 더 순수 혈통이며, 유도된 장염도 더 안정적입니다. Babl/C 생쥐를 사용할 때는 사전 실험을 권장합니다.
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