1. PAMPA란 무엇인가요?
Parallel Artificial Permeability Assays의 약자로, 잠재적인 약물후보 화합물의 세포막 투과성을 평가하는 방법입니다.
2. 어떤 종류의 PAMPA Kit가 있나요?
테스트 화합물의 gastrointestinal (GI) membrane permeability 측정을 위한 PAMPA kit (#PAMPA-096)과 blood brain barrier (BBB) membrane permeability 측정을 위한 PAMPA-BBB Kit (#PMBBB-096), skin membrane permeability 측정을 위한 PAMPA-Skin Kit (#PMSKN-096)으로 제공됩니다.
3. 투과성 대조군(permeability control)은 무엇인가요?
투과 속도에 따라 High, Medium, Low Permeability
Control로 구분되며, 테스트 화합물의 투과도를 비교하기 위해 이용됩니다. 각 Kit별로 제공되는 control은 다음과 같습니다. 각각 DMSO 10mM stock 으로 제공됩니다.
- PAMPA-GI Kit : Chloramphenicol, Diclofenac, Theophylline
- PAMPA-BBB Kit : Promazine Hydrochloride, Diclofenac
- PAMPA-Skin Kit : Methyl Paraben, Propyl Paraben, Theophylline
4. Kit에는 어떤 제품이 제공되나요?
Donor Plate, Acceptor Plate,Working Tray, Permeability Control이 제공되며, artificial membrane을 만들기 위한 구성품이 제공됩니다.
- PAMPA-GI Kit : Dodecane과 Dried Lecithin
- PAMPA-BBB Kit : Dodecane과 Dried Brain Lipid
- PAMPA-Skin Kit : Skin Mimic Solution
5. Donor plate의 막은 어떤 재질로 만들어 졌나요?
0.45 µm 사이즈의 소수성 PVDF membrane을 이용합니다.
6. PAMPA-BBB kit의 경우, 이미 녹인 BBB 지질은 얼마 동안 안정한가요?
일단 용해되면 지질은 -20도에 보관해야
하며, 이 조건에서 6일 이내 사용할 수 있습니다.
7. Donor plate와 Acceptor plate는 strip 타입으로 되어 있나요? 아니면 일체형인가요?
Donor Plate와 Acceptor Plate는 개별 strip이 아닌 일체형입니다.
8. PBS에서 샘플이 500µM에서 용해되지 않습니다. DMSO의 농도를 더 높여도 되나요?
더 높은 농도의 DMSO 용액을 사용하면, Acceptor solution에서 분광광도계
백그라운드가 증가하고, 막도 변화시켜 결과에 영향을 미칠 수 있으므로 권장하지 않습니다.
테스트 화합물이 5% DMSO를 함유 PBS에서 용해되지
않는다면, 원심분리기에서 13,000xg로 10분간 원심분리한 후 상층액을 사용하세요. 평형 스탠다드 용액을
위해서는 80µL의 새로운 donor solution을 120 µL의 PBS와 함께 사용하세요.
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