1. PAMPA는 어떤 실험인가요?
Parallel Artificial Permeability Assays의 약자로, 잠재적인 약물후보 화합물의 세포막 투과성을 평가하는 방법입니다.
2. 어떤 종류의 PAMPA Kit가 있나요?
테스트 화합물의 gastrointestinal (GI) membrane permeability 측정을 위한 PAMPA kit (#PAMPA-096)과 blood brain barrier (BBB) membrane permeability 측정을 위한 PAMPA-BBB Kit (#PMBBB-096), skin membrane permeability 측정을 위한 PAMPA-Skin Kit (#PMSKN-096)으로 제공됩니다.
3. 투과성 대조군(permeability control)으로는 어떤 물질을 이용하나요?
투과 속도에 따라 High, Medium, Low Permeability
Control로 구분되며, 테스트 화합물의 투과도를 비교하기 위해 이용됩니다. 각 Kit별로 제공되는 control은 다음과 같습니다. 각각 DMSO 10mM stock 으로 제공됩니다.
- PAMPA-GI Kit : Chloramphenicol, Diclofenac, Theophylline
- PAMPA-BBB Kit : Promazine Hydrochloride, Diclofenac
- PAMPA-Skin Kit : Methyl Paraben, Propyl Paraben, Theophylline
4. Kit에는 어떤 제품이 제공되나요?
Donor Plate, Acceptor Plate,Working Tray, Permeability Control이 제공되며, artificial membrane을 만들기 위한 구성품이 제공됩니다.
- PAMPA-GI Kit : Dodecane과 Dried Lecithin
- PAMPA-BBB Kit : Dodecane과 Dried Brain Lipid
- PAMPA-Skin Kit : Skin Mimic Solution
5. Donor plate의 막은 어떤 재질로 만들어 졌나요?
0.45 µm 사이즈의 소수성 PVDF membrane을 이용합니다.
6. PAMPA-BBB kit의 경우, 이미 녹인 BBB 지질은 얼마 동안 안정한가요?
일단 용해되면 지질은 -20도에 보관해야
하며, 이 조건에서 6일 이내 사용할 수 있습니다.
7. Donor plate와 Acceptor plate는 strip 타입으로 되어 있나요? 아니면 일체형인가요?
Donor Plate와 Acceptor Plate는 개별 strip이 아닌 일체형입니다.
8. PBS에서 샘플이 500µM에서 용해되지 않습니다. DMSO의 농도를 더 높여도 되나요?
더 높은 농도의 DMSO 용액을 사용하면, Acceptor solution에서 분광광도계
백그라운드가 증가하고, 막도 변화시켜 결과에 영향을 미칠 수 있으므로 권장하지 않습니다.
테스트 화합물이 5% DMSO를 함유 PBS에서 용해되지
않는다면, 원심분리기에서 13,000xg로 10분간 원심분리한 후 상층액을 사용하세요. 평형 스탠다드 용액을
위해서는 80µL의 새로운 donor solution을 120 µL의 PBS와 함께 사용하세요.
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