세포 보관용 Cell Freezing Medium | 고마바이오텍

특징

• Cryopreservation 을 위해 사용되는 Ready-to-use solution 제품입니다. 
• 90% FBS(100% US Origin) + 10% DMSO 로 구성되어 있습니다. 
• 최대성능을 보장하기 위해, 랏별 품질테스트가 완료되었습니다. 
• 대부분의 cell line 에 보편적으로 사용 가능합니다. 
• 0.2 um 멸균 필터링을 통해 제공됩니다.

사용

• 세포 준비
  냉동 절차에는 활발하게 성장하고 있는 건강한 세포 배양을 사용해야 합니다. 이는 세포를 세포 성장의 로그 단계에 유지할 때 가장 잘 달성됩니다. B세포 하이브리도마의 경우, 70%를 초과하는 생존 가능성을 가진 세포의 밀도가 4-5x10^5 세포/mL가 가장 선호됩니다. 적절한 부피의 세포를 (200xg로 5-10분 동안) 원심분리하고, 배양 상층액을 버리고 (2-8도의) 차가운 Cell Freezing Medium II에서 재현탁합니다. 최종 세포 밀도는 1-10x10^6 세포/mL가 권장됩니다. 1-2mL의 세포현택액을 라벨링된 cryovial에 옮깁니다. 파이페팅 시간을 포함하여 5-10분 동안 2-8도에서 세포를 평형에 이르도록 합니다.
• 세포 냉동
  적절한 냉각 속도로 세포를 동결하였을 때, 동결 후 생존 세포의 회복이 최적화됩니다. 이는 스티로폼 박스에 바이알을 넣어 영하 70도의 저온 냉동고에서 오버나이트로 둔 뒤 아침에 액체 질소에 이동하여 보관하여 수행할 수 있습니다. 대체적인 방법으로는, 프로그래밍할 수 있는 냉동 장치를 이용하여 세포를 1분당 1도씩 얼려서 세포 현탁액이 영하 30도가 되도록 한 뒤 영하 100도가 될 때까지 1분 당 5-20도 얼려도 됩니다. 그 후 바이알을 액체 질소 냉장소에 옮겨 장기 보관할 수 있습니다.
• 세포 준비
  37도water bath에서 각 세포 바이알을 빠르게 해동합니다. 내용물을 10배 부피의 성장 배지로 옮긴 뒤 5-10분 동안 200 x g에서 세포 현탁액을 원심분리합니다. 상층액을 버린 뒤, 신선한 성장배지에서 최종 세포 밀도가 2-4x10^6 살아있는 세포/mL가 되도록 재현탁하고 현탁액을 세포 배양 플라스크로 옮깁니다.