동물대체 피부 감작성 시험 서비스 | 고마바이오텍

인간세포주 활성 테스트 (h-CLAT) - cellular assay  

• h-CLAT (human Cell Line Activation Test)는 시험물질을 Human cell line인 THP-1 (monocytic leukemia cell line)과 배양하여, 피부 감작성을 가진 화학물질이 있을 경우 면역세포의 세포막에 특정 항원의 발현이 증가한다는 원리에 의한 시험법입니다.
• Dendritic cell에 CD86과 CD54가 발현하는 정도를 FACS로 확인합니다. (442e)

Episkin을 이용한 62개 유전자 marker 분석 (SENS-IS) - tissular assay  

• 시험물질을 Episkin에 인큐베이션한 뒤 homogenization하여 얻은 과발현된 RNA를 RT-PCR로 측정하여, irritation, ARE, SENS-IS genes 의 세 그룹으로 나누어진 62개의 유전자 발현정도를 기반으로 하는 평가 방법입니다. (442d) 
• 3D로 재구성된 표피 Episkin® 을 사용합니다.
  
• LLNA 분석과 동일한 정량적 평가방법입니다. (NS, Weak, Moderate, Strong and Extreme)
• 민감성 반응과 염증 반응을 구별합니다. 
• OECD 에 의해 검증된 방법입니다. 
• 방법 : 
         1) Episkin에 화합물 처리 
         2) Episkin 세척
         3) 6시간 후에 tissue를 homogenization하여 RNA 추출
         4) 민감도, 염증등을 판단할 수 있는 62개의 바이오마커에 대한 PCR 진행
• 해석 
• 24 Irritation genes : 16개이상 과발현시 과민감성
• 17 ARE genes : 7개 이상 과발현시 민감성
• 21 SENS IS genes : 7개 이상 과발현시 민감성