ViaPlex 2-Color Cell Barcoding Kits

시약 및 기기 상세

ViaPlex 2-Color Cell Barcoding Kits

Maker : BIOTIUM

최대 15개의 서로 다른 세포 집단을 각각 다른 색깔의 바코드로 이름표를 붙인 뒤, 하나의 tube에 넣고 동시에 분석할 수 있게 하는 시약입니다.

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특징

ViaPlex™ 세포 바코딩 키트는 유동 세포 분석을 위한 편리하고 유연한 세포 바코딩 기능을 제공합니다. 세포는 공유 결합 방식의 형광 염료로 라벨링되며, 각 염료당 최대 3가지 농도를 사용할 수 있습니다. 이를 통해 최대 15개의 서로 다른 cell population을 하나의 튜브에 모아 동시에 분석할 수 있습니다. 추가적인 보정(compensation)을 거치면 16번째 샘플까지도 추가가 가능합니다.

세포 바코딩으로 시간 및 시약 비용 절감: 15번 해야 할 실험을 한 번에 하므로, 들어가는 시약의 양과 실험 시간이 획기적으로 줄어듭니다.
최대 15개 샘플 혼합 가능: 15개의 샘플을 각각 분석하는 대신 하나로 합쳐서(Pooling) 처리할 수 있습니다.
샘플 튜브 개수 감소 및 오차 최소화: 관리해야 할 튜브 수가 줄어들어 실험 중 실수를 방지하고 데이터 정리도 수월하며 데이터 일관성이 높아집니다.
다양한 염색법과 호환: 세포 표면 단백질 염색뿐만 아니라 세포 내부 염색 실험과도 함께 사용할 수 있습니다.
생세포(Live cells) 사용 가능: 살아있는 세포에 바로 적용할 수 있으며, 바코딩 작업 후에 필요에 따라 고정(Fixation) 과정을 거칠 수도 있습니다.
표준 채널 사용: 유세포 분석기에서 가장 흔히 쓰이는 Pacific Blue®와 FITC 채널을 사용하기 때문에 별도의 특수 장비가 필요 없습니다.

실험 과정

1. 바코딩 : 각 샘플 튜브에 서로 다른 농도의 ViaPlex™ 염료를 넣어 세포를 라벨링합니다.

2. 풀링(Pooling) : 라벨링된 15개의 샘플을 하나의 튜브로 합칩니다.

3. 일괄 처리 : 한꺼번에 항체 염색을 하고 유세포 분석기(Flow Cytometer)로 측정합니다.

4. 데이터 분리 : 소프트웨어에서 형광 강도 차이를 이용해 각 샘플 데이터를 다시 나눕니다(Deconvolution).

Kit 구성품

ViaPlex™ 405: 405nm 레이저(Pacific Blue® 채널)용 염료
ViaPlex™ 488: 488nm 레이저(FITC 채널)용 염료
DMSO: 염료를 녹이는 유기 용매

실험 데이터

단 하나의 튜브에서 최대 15개의 서로 다른 세포 집단을 분석하여, 매 분석(Run)의 효율을 극대화할 수 있습니다.

15개의 별개 Jurkat 세포 집단을 15가지의 바코드 염료 조합으로 염색한 후, 하나의 튜브에 합쳐 유세포 분석을 진행했습니다. x축은 V450 채널의 ViaPlex™ 405, y축은 B525 채널의 ViaPlex™ 488로 설정한 dot plot은 15개의 명확히 구분되는 세포 집단을 보여줍니다.각 세포 집단은 후속 분석을 위해 gating 및 라벨링 처리가 완료되었습니다.

바코딩은 세포 처리(treatment) 전이나 후, 어느 단계에서도 수행할 수 있습니다.

말초혈액단핵구(PBMC)를 100 ng/mL의 IL-2 또는 200 nM의 PMA로 30분간 처리하기 전 또는 처리한 후에 ViaPlex™ 2-Color Cell Barcoding Kit(405 & 488)를 사용하여 바코딩했습니다. 바코딩과 세포 처리가 끝난 후, 세포들을 하나로 합쳐 CD3와 pERK1/2를 염색했습니다. 이 플롯(plots)들은 각 바코드 집단에서 CD3 양성(CD3+) 세포만을 게이팅하여 나타낸 것입니다. IL-2로 처리된 T 세포(속이 비어 있는 분홍색 히스토그램)는 처리되지 않은 세포(회색 히스토그램)와 동일해 보이지만, PMA로 처리된 T 세포는 높은 수준의 pERK1/2(속이 채워진 분홍색 히스토그램)를 나타냅니다. 약물 처리 이전에 바코딩을 했든 이후에 했든 관계없이 염색 결과는 동일하게 나타납니다.

주문정보

주문정보 - Cat No, PRODUCT, SIZE, 수량 등 항목으로 구성되어있습니다.
	Product	Cat.No.	Size	Maker	Qty	Data Sheet	MSDS
	ViaPlex™ 2-Color Cell Barcoding Kit (405 and 488)	30148-T	3 assays (45 samples)	BIOTIUM
	ViaPlex™ 2-Color Cell Barcoding Kit (405 and 488)	30148	10 assays (150 samples)	BIOTIUM