단백질 전기영동 워크플로우 추천제품

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단백질 전기영동 워크플로우 추천제품

Maker : KOMA

단백질 젤 전기영동 워크플로우에 따른 추천제품을 소개합니다.

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단백질 젤 전기영동 워크플로우

단백질 젤 전기영동(Protein Gel Electrophoresis)은 단백질 혼합물을 전기장을 이용해 크기(분자량)에 따라 분리하는 실험 기법입니다.

가장 흔히 쓰이는 방식은 SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)로, 단백질의 고유한 전하와 모양을 무시하고 오직 '길이(크기)'에 의해 분리합니다.

전기영동을 통해, 알고 있는 표준 시료(Ladder)와 비교해 분석하고자 하는 단백질의 크기를 확인할 수 있고, 목표 단백질 외에 다른 잡단백질(Band)이 얼마나 섞여 있는지 확인할 수 있습니다.

Precast Gel은 제조사의 엄격한 QC(Quality Control) 하에 기계적으로 생산되므로, 젤 내 아크릴아마이드의 가교 밀도(Cross-linking density)와 pH가 균일합니다. 이는 실험 간 변수(Inter-experimental variation)를 최소화하여 데이터의 정밀도를 높입니다. 또한, 서로 다른 날짜에 수행한 실험 결과 간에도 밴드 이동 패턴(Migration pattern)의 일관성을 유지할 수 있어, 정량적 비교 분석 시 데이터의 신뢰성을 담보하며, 수동 제작으로는 구현이 어려운 정교한 gradient gel을 통해 광범위한 분자량을 가진 단백질 혼합물을 높은 해상도로 분리할 수 있습니다.

전기영동 워크플로우에 따른 추천 제품을 소개합니다.

Step 1.	Step 2.	Step 3-1. 혹은	Step 3-2
시료 및 PAGE Gel 준비	단백질 전기영동	염색 및 젤 건조	Western Blot
단백질 분리가 필요한 시료를 준비하고, 단백질 젤을 만드는 단계	수직형 전기영동 장치를 이용하여 젤 내에서 단백질의 분자량에 따라 분리하는 단계	Step 2 전기영동 후, 단백질 염색액을 이용하여 분리된 단백질 밴드를 염색하여 가시화 하는 단계	Step 2 전기영동 후, 단백질을 membrane으로 이동시키고 항체를 이용하여 웨스턴 블롯을 진행하는 단계
추천제품 및 서비스
국내제작 프리캐스트 단백질 젤	EzCell 전기영동 장치	Coomassie 염색	단백질 transfer 확인용 마커
Premade Buffer	단백질 분자량 측정용 마커	Silver Staining Kit	Bovine Serum Albumin (BSA)
단백질 정제, 농축 column	Loading Control Antibody	Lumitein™ Protein Gel Stain	Western Blot Blocking Buffer
다량 샘플 정제용 Plate		Gel Drying System	PVDF Transfer Membrane
젤, 버퍼 제작용 chemicals		ViewOne LabLite	INSTA-Blot Membrane
TCEP Reducing Agent			ECL Substrate Kit
Protease Inhibitor Cocktail			동물성분이 없는 친환경 ECL 용액
			Antibody Stripping Buffer
			Western Blot 분석서비스

▒ 단백질 분리를 위한 프리캐스트 젤

국내에서 직접 제작되어 신속하고 경제적인 가격으로 제공됩니다.
젤 내부의 아크릴아마이드 농도가 매우 균일하게 제작되어, 단백질 밴드가 휘어지지 않고 직선으로 선명하게(Sharp band) 분리됩니다.
분리하려는 목적에 따라 다양한 종류의 젤을 제공합니다.
Bio-Rad나 Invitrogen 등 주요 제조사의 전기영동 장치와 대부분 호환되어 기존 장비를 그대로 사용할 수 있습니다.
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▒ 단백질 마커

별도의 가열(Boiling)이나 환원제 첨가 과정 없이 냉장고에서 꺼내 바로 젤에 로딩할 수 있어 편리합니다.
전기영동 시 밴드가 퍼지지 않고 칼처럼 날카롭게 분리되어, 인접한 분자량 사이의 구분이 명확합니다.
Prestained 타입의 경우, Western Blot 과정에서 단백질이 젤에서 멤브레인으로 얼마나 잘 옮겨졌는지 육안으로 즉시 확인할 수 있습니다.
전기영동이 잘 내려가고 있는지 실시간으로 보고 싶다면 >> Multicolor/PreBlue Marker 이용
내 단백질의 정확한 분자량을 측정해야 한다면 >> Unstained Protein-Blue Marker 이용

▒ 전기영동장치

젤 전개를 위한 전기영동 장치 >> EzCell
전기영동 후 membrane으로의 transfer를 위한 장치 >> EzBlot
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▒ 단백질 밴드 염색

단백질 전기영동(SDS-PAGE)이 끝난 후, 투명한 겔 속에 분리된 단백질들을 눈으로 확인하기 위해서는 단백질 염색 시약이 필요합니다. 염색 시약은 감도, 속도, 후속 실험 가능 여부에 따라 선택이 달라집니다.
Coomassie Blue는 가장 보편적으로 사용되는 염색약으로, 단백질의 아미노산과 결합하여 푸른색 띱니다.
Silver 염색은 질산의 은이온이 단백질과 결합하여 환원되는 원리를 이용하며, Coomassie 보다 약 10-100배 더 민감하여 적은 양의 단백질도 잡아낼 수 있습니다.

▒ Blocker

단백질 전기영동(SDS-PAGE) 이후 진행되는 웨스턴 블랏(Western Blot) 과정에서 Blocking은 실험의 성패를 결정짓는 매우 중요한 단계입니다.
Blocking은 항체가 타겟 단백질에만 붙고, 멤브레인의 빈 공간에 비특이적으로 달라붙지 않게 합니다. 또한 필름이나 이미지 분석 시 전체가 까맣게 나오거나 지저분한 점들이 생기는 것을 방지합니다.

▒ Western Blot

웨스턴 블랏(Western Blot)은 복잡한 단백질 혼합물(세포나 조직 추출액) 속에서 내가 찾고자 하는 특정 단백질이 있는지, 그리고 그 양이 얼마나 되는지를 확인하는 실험 방법입니다.
전기영동 및 transfer 후, 찾으려는 타겟 단백질에 대한 1차 항체 및 2차 항체를 이용 후 효소에 반응하는 시약 (ECL등)을 처리하여 타겟 단백질이 있는 위치에서 발생하는 빛을 검출합니다.
Western blot을 통해 시료내 타겟 단백질이 들어있는지, 대조군과의 비교에서 타겟 단백질의 양 증감, 단백질의 크기 등을 분석할 수 있습니다.
전기영동 부터 Western Blot 결과까지 ! >> Western Blot 서비스 바로가기