TyraMax™ Amplification Dyes and Kits | 고마바이오텍

특징 

• TSA(tyramide signal amplification)는 아주 적은 양의 target도 잘 보이게 만드는 고감도 증폭 기술입니다.
• CARD(Catalyzed Reporter Deposition)라고도 불리며, ICC, IHC, FISH와 같은 실험에서 널리 쓰입니다.
• TSA는 감도가 뛰어나고, 반복 염색 기반 멀티플렉싱(CycIF)과도 잘 맞아,  최근 spatial biology에서 거의 필수 기술처럼 사용됩니다.
• TyraMax™는 고성능 TSA 염료로 개발되어, Aluora나 Opal 같은 시약보다 더 밝고 광안정성이 더 좋은 신호를 제공합니다. 
• 파란색부터 근적외선 영역까지 다양한 tyramide 색상이 제공됩니다. 
• Amplification buffer에 섞어 만든 working solution 상태로 최대 24시간 동안 안정적이기 때문에 자동화 염색 같은 워크플로우에서 다루기 쉽습니다. (근적외선 염료 포함) 
• 다른 TSA dye 보다 더 밝거나, 또는 장시간 색상이 유지됩니다. 
• 단품 dye / trial size sampler/ 3색 혹은 5색 dye set (DAPI 핵 염색)으로 다양한 구성이 제공되어 멀티플렉싱이 가능합니다. 
• 최적의 결과를 위해 TyraMax™ 사용 시 Tyramide Amplification Buffer Plus (Cat. No. 22029)를 함께 사용하는 것을 권장합니다.  

실험 데이터 

다양한 색상 라인업으로 패널 설계 유연성 제공   

PFA-fixed HeLa cell가 WGA-HRP로 염색된 모습을 Tyramide Amplification Buffer Plus를 함께 사용한 TyraMax™ Amplification Dye로 검출하였습니다. Evident FV4000 confocal system에 40배 대물렌즈를 사용하여 촬영했습니다.

다른 TSA 시약 대비 우수한 밝기 

TyraMax™ 430/500은 다른 시판용 TSA dye에 비해 밝기가 뛰어납니다.

PFA-fixed HeLa cell를 WGA-HRP로 염색하고, TyraMax™ 430/500 Amplification Dye, Opal Polaris 480 Reagent (Ex/Em 450/500 nm), 또는 Aluora 430 Spatial dye에 Tyramide Amplification Buffer Plus를 함께 사용하여 검출하였습니다. Evident FV4000 confocal system에서 40배 오일 대물렌즈를 사용해 촬영하였고 405 nm로 excitation하여 Alexa Fluor 430 detection channel에서 신호를 관찰했습니다. 

신뢰할 수 있는 신호 안정성

TyraMax™ 630/650 은 시판 중인 다른 TSA 염료들에 비해 밝기와 광안정성이 매우 우수합니다. 

PFA-fixed HeLa cell을 WGA-HRP로 염색한 뒤 TyraMax™630/650 Amplification Dye, Opal™ Polaris 650 Reagent, 또는 Aluora™ 647 Spatial dye 중 하나로 신호를 검출하였습니다. 이미지는 Evident FV4000 confocal system에서 40배 오일 렌즈를 사용해 촬영했으며 640 nm로 excitation하여 Alexa Fluor 647 detection channel에서 신호를 관찰하였습니다. 

또한 광안정성 츨정은 Olympus IX71 epifluorescence microscope에서 Cy5 filter cube를 사용해 진행하였습니다. 염색된 세포를 10초마다 한 번씩, 총 120초 동안 연속 촬영하였고 평균 형광 강도는 첫 번째 이미지 기준 (1 또는 100%)으로 정규화하여 비교했습니다. 

TyraMax™ 740/770은 working solution(작업용 희석액) 상태로 최소 24시간 안정합니다. 

TyraMax™ 740/770과 Aluora 750 dye를 동일한 OD(흡광도)로 맞춘 용액으로 준비했으며, 용매는 Tyramide Amplification Buffer Plus + 과산화수소 0.0015% 조건을 사용했습니다. 먼저 Agilent Cary 60 분광광도계로 흡광도를 측정한 뒤, 용액을 실온에서 빛을 차단한 상태로 보관하면서 최대 24시간까지 여러 시간대에서 흡광도를 다시 측정했습니다. 그 결과, TyraMax™ 740/770은 과산화수소가 있는 조건에서도 24시간 동안 안정적이었던 반면, Aluora 750은 완전히 분해되었습니다.





주요 제품 

TyraMax™ Amplification Dye (단품 Dye) 

TyraMax™ 3-Plex Amplification Dye Set with DAPI (Cat. No. 33029)

TyraMax™ 5-Plex Amplification Dye Set with DAPI (Cat. No. 33030) 

TyraMax™ Amplification Dye Spectral Sampler (Cat. No. 33031)