특징
- Bovine, Canine, Chicken, Dolphine, Equine, Feline, Mouse, Human, Rabbit, Ovine, Swine, Rat, Zebrafish등 다양한 종의 cytokine 측정을 위해 직접 제작하는 Do-It-Yourself ELISA Kit 입니다.
- 구성 :
- Capture antibody
- Protein standard
- Detection antibody
실험 과정
1) Capture antibody를 DPBS에 넣어 working solution 준비
2) 100ul의 Capture antibody working solution을 각 well에 분주
3) Plate Sealer로 plate를 덮고 실온에서 12-24시간 incubation
4) Capture antibody를 버리고 plate의 물기를 닦음
5) 250ul의 Blocking buffer를 각 well에 분주
6) Plate Sealer로 plate를 덮고 실온에서 1-3시간 incubation
7) Blocking buffer를 버리고 plate의 물기를 닦음
8) Standard와 분석할 sample을 준비
9) 100ul씩을 각 well에 분주
10) Plate Sealer로 plate를 덮고 실온에서 1시간 incubation
11) Wash buffer로 plate를 4번 washing
12) Detection antibody를 Diluent에 넣고 working solution 준비
13) 100ul의 Detection antibody working solution을 각 well에 분주
14) Plate Sealer로 plate를 덮고 실온에서 1시간 incubation
15) Wash buffer로 plate를 4번 washing
16) Streptavidin-HRP를 Diluent에 넣어 working solution 준비
17) 100ul의 Streptavidin-HRP working solution을 각 well에 분주
18) Plate Sealer로 plate를 덮고 실온에서 30분간 incubation
19) Wash buffer로 plate를 4번 washing
20) 100ul의 TMB Solution을 각 well에 분주
21) 어두운 실온에서 30분간 (혹은 필요한 시간동안) color 반응 관찰
22) 100ul의 Stop Solution 처리하여 반응 종료
23) 450nm에서 plate reader로 흡광도 측정