TEV Protease Kit | 고마바이오텍

특징

TEV Protease는 Tobacco Etch Virus (TEV)에서 유래한 고도로 서열 특이적인 cysteine protease입니다. TEV Protease 인식 서열 중 가장 높은 촉매 효율을 보이는 서열은 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Ser이며, Gln과 Ser 잔기 사이에서 최적의 절단이 일어납니다. 그러나 P1' 위치의 아미노산(절단 사이트 바로 아래의 아미노산)은 Gly, Ala, Met, Cys 또는 His일 수도 있습니다. 이 Protease는 Maltose-binding protein (MBP) 또는 poly-histidine 같은 친화성 태그를 융합 단백질에서 절단하는 데 사용됩니다. 절단을 위한 선택적인 온도는 30°C이지만, 4°C와 같은 낮은 온도에서도 사용할 수 있습니다.

• TEV Protease 인식 서열 E-N-L-Y-F-Q↓(S/G/A/M/C/H)를 포함하는 단백질이나 펩타이드를 절단하는 데 사용됩니다.
• E. coli에서 발현된 재조합 TEV Protease는 단일 비당화된 폴리펩타이드 사슬로 구성되며, N-말단에 7X His-tag가 있어 니켈 친화성 크로마토그래피를 사용하여 반응에서 쉽게 제거할 수 있습니다.
• SDS-PAGE를 통해 반응 효율을 평가할 수 있는 Control Substrate (80.3 kDa)가 제공됩니다.
• Control Substrate가 TEV에 의해 절단되면,  SDS-PAGE에서 43.3 kDa와 37 kDa 두 개의 밴드를 확인할 수 있습니다.

구성품

• TEV Protease with N-terminal 7X His-tag
• Control Substrate (MBP-TEV substrate-His6)
• 10X Reaction Buffer

데이터

Reducing SDS-PAGE and One-Step Blue® staining of Control Substrate (3 ug) in the absence (Lane 1) or presence (Lane 2) of TEV Protease. Samples were incubated at 30°C for 1 hour prior to gel analysis. Minor band around 100 kDa may be detectable in uncleaved and cleaved Control Substrate samples.