단백질의 구조 분석 배지 | SelenoMet Dream Media Kit | 고마바이오텍

특징

• 단백질 내의 메티오닌을 셀레노메티오닌으로 치환하면, 셀레늄 원자가 X선을 강하게 산란시켜 이상 산란(Anomalous Scattering) 신호를 줍니다. 이 신호를 추적하여 단백질 내부 원자들의 위치(위상)를 계산할 수 있으며, 이를 MAD(Multi-wavelength Anomalous Diffraction) 또는 SAD 기법이라고 합니다.
• Protein Ark의 SelenoMet 키트는 연구자가 복잡하게 배지를 조제할 필요가 없도록 최적화된 구성을 제공합니다.
• 주로 최소 배지(Minimal Media) 기반으로, 대장균이 스스로 메티오닌을 만들지 못하게 억제하거나, 메티오닌 영양요구체(Auxotroph) 균주를 사용하여 셀레노메티오닌만 흡수하도록 유도합니다.
• 생물학적으로 활성이 있는 L-폼(L-form) 셀레노메티오닌을 제공하여 단백질 합성이 효율적으로 일어나게 합니다.
• 셀레늄 치환 효율을 극대화하기 위해 메티오닌 합성을 억제하는 특정 아미노산 조합이 포함되어 있습니다.
• 단백질 내 메티오닌 잔기를 셀레노메티오닌으로 거의 완벽하게(90% 이상) 교체하여 실험 성공률을 높입니다.
• 셀레늄은 세포에 독성이 있을 수 있는데, 이 키트는 대장균의 성장을 방해하지 않으면서 단백질 발현량을 유지하도록 영양 성분이 밸런싱되어 있습니다.
• 배양에 필요한 모든 농축액과 파우더가 세트로 되어 있어 실험의 재현성이 높습니다.

사용 단계  

1. 세포 배양: 일반 배지에서 대장균을 일정 농도까지 키웁니다.

2. 배지 교체: 세포를 가라앉힌 후 SelenoMet 최소 배지로 옮깁니다.

3. 대사 억제: 메티오닌 합성 경로를 차단하는 아미노산을 첨가합니다.

4. 유도(Induction): L-Selenomethionine과 IPTG를 넣어 셀레늄이 포함된 단백질 합성을 유도합니다.

데이터

그림 . Induction of Pt-GFP using Dream Mix yielded the same level of protein as induction with IPTG.

종류