1. ProteomProfiler Antibody Array는 어떤 제품인가요?
단일 샘플에서 최대 119가지 분석 대상을 동시에 탐지할 수 있는 항체 어레이로, cytokine, kinase, angiogenesis, apoptosis등 다양한 실험에 스크리닝 용으로 사용될 수 있습니다.
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2. 키트에 포함된 용해 버퍼를 다른 키트에서 바꿔 써도 되나요?
아니요. 제공된 버퍼는 특정 키트와 함께 최적화되어 있으므로, 다른 키트의 버퍼를 사용하는 것은 권장되지 않습니다.
3. Proteome Profiler 어레이는 정량적인가요?
아니요, 반정량적입니다. 스폿 강도를 비교하여 단백질 수준의 상대적인 차이를 측정합니다.
4. 조직 시료(예: 간 조직)를 사용할 수 있나요?
일부 키트에서는 조직 용해물이 사용 가능하지만, 반드시 해당 키트의 설명서를 확인해야 합니다.
5. UV 트랜스일루미네이터로 이미지를 얻을 수 있나요?
권장되지 않습니다. 대신 X-ray 필름이나 디지털 이미징 시스템 사용이 좋습니다.
6. Bio-Rad Chemi Doc으로 이미지 촬영 가능한가요?
네, 가능하지만 최적의 조건을 사용자가 직접 설정해야 합니다.
7. ImageJ로 어레이 이미지를 분석할 수 있나요?
가능합니다. 기술지원팀을 통해 가이드라인을 받을 수 있습니다.
8. 스폿 신호를 reference spot으로 정규화할 수 있나요?
권장되지 않습니다. reference spot은 단백질 양에 비례하지 않으므로, 배경 신호를 빼는 방식이 좋습니다.
9. RIPA 버퍼를 사용해도 되나요?
가능하지만, RIPA는 단백질을 변성시켜 결과에 영향을 줄 수 있어서 권장하지 않습니다.
10. 냉동된 혈청 샘플은 해동 후 원심분리해야 하나요?
아니요. 해동 후 바로 사용할 수 있습니다.
11. 반드시 추천된 Protease Inhibitor를 사용해야 하나요?
가능한 한 권장 억제제를 사용하는 것이 좋습니다. 다른 것을 사용할 경우 효과를 검증해야 합니다.
12. 다른 종의 샘플도 사용 가능한가요?
어떤 항체는 다른 종 단백질에도 반응할 수 있지만, 검증된 것은 아니므로 확인 후 사용하는 것이 좋습니다.
13. reference spot은 단백질 양에 비례하나요?
아니요. reference spot은 정렬 및 검출 확인용일 뿐입니다.
14. 정량 분석이 가능한 multiplex assay도 있나요?
예, Luminex 와 같은 정량형 분석 키트를 이용하여 멀티플렉스 분석을 할 수 있습니다. 자세히 보기
15. Lysis Buffer 6에는 어떤 억제제가 들어 있나요?
Phosphatase 억제제는 포함되어 있으나, protease 억제제는 들어 있지 않습니다.
16. 적절한 노출 시간은 어떻게 정하나요?
1–10분 사이에서 여러 번 시도하여 적정 노출 시간을 찾는 것이 좋습니다.
17. 과다 노출은 어떻게 알 수 있나요?
두 개의 reference spot이 하나로 뭉쳐 보이면 과다 노출된 것입니다.
18. 하나의 키트로 몇 개의 샘플을 처리할 수 있나요?
일반적으로 4개의 샘플을 처리할 수 있으며, 컨트롤을 포함하는 것이 좋습니다.
19. 지방 조직은 어떻게 준비하나요?
지방 조직의 경우 별도의 프로토콜에 따라 준비해야 하며, PBS는 최소화하고 단백질 농도를 조절해야 합니다.
20. 투명 플라스틱 커버는 어디에 사용되나요?
어레이 막 위에 템플릿을 정렬할 때 사용합니다.
21. LI‑COR 시스템으로 형광 분석이 가능한가요?
가능합니다. 적절한 형광 검출 시약을 사용하면 LI‑COR에서 이미지 분석이 가능합니다.
22. 권장되는 X-ray 필름과 캐세트는 무엇인가요?
Kodak BioMax Light 필름과 8×10인치 캐세트가 권장됩니다.
23. 샘플을 deduplicate로 분석해야 하나요?
필수는 아닙니다. 각 스폿은 자동으로 이중으로 배열되어 있습니다.
24. 이 어레이가 ELISA보다 나은 점은 무엇인가요?
동시에 여러 단백질을 한 번에 분석할 수 있고, 특별한 장비가 필요 없습니다.
25. 어레이 막의 크기는 얼마인가요?
약 6.4 cm × 2.2 cm입니다.
26. 어떤 이미지 분석 소프트웨어를 사용하나요?
QuickSpots라는 소프트웨어를 사용합니다.
27. Transmission mode scanner는 무엇인가요?
투명 필름을 뒤에서 조명으로 읽는 스캐너로, Epson V750 등이 있습니다.
28. 민감도는 어느 정도인가요?
항목마다 다르며, 정확한 정량보다는 상대적인 비교에 적합합니다.
29. 스폿 간격은 어떻게 되나요?
각 스폿의 지름은 약 1mm이고, 중심 간 거리는 2~3mm입니다.
30. 어떤 샘플 타입이 검증되었나요?
세포 용해물 외에, 혈청, 혈장, 소변, 조직 용해물 등도 일부 키트에서 검증되었습니다.
31. 스폿이 도넛 모양처럼 보이는 이유는 왜 그런가요?
건조 과정에서 발생하는 자연스러운 현상입니다. 전체 픽셀 밀도를 기준으로 측정해야 합니다.
32. Western blot과 결과가 다를 수 있나요?
네, 어레이는 native protein을, Western blot은 변성 protein을 감지하므로 결과가 다를 수 있습니다.
33. Array membrane을 스트립해서 재사용할 수 있나요?
아니요. 어레이는 1회용으로 설계되어 있으며 재사용은 불가능합니다.
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