Mycoplasma Removal Agent (MRA)

• Quinolones 계열의 항생제로써, mycoplasma의 DNA gyrase만을 inhibition하여 세포에는 전혀 영향을 주지 않습니다.
• Mycoplasma로 오염된 세포의 media에 첨가 후, 약 1주일간의 배양으로 제거가 완료되므로 사용이 간편하고 시간이 단축됩니다.
• 대부분의 Mycoplasma에 적용이 가능하여 별도의 추가 시약이 필요하지 않습니다.
• Cell culture시 낮은 농도로 MRA를 미리 사용하면 재오염을 예방할 수 있습니다.
• 차광하여 실온에서 보관하므로 온도에 의한 Activity 변화가 없어 항상 일정한 결과를 얻을 수 있습니다.

1. Mycoplasma가 오염된 세포에 MRA를 1/100 농도로 첨가하고 1주일간 배양시킵니다. (예, 배지 10ml 당 MRA 0.1ml 첨가)
2. Media를 교환하거나 passage 진행 시에도 동일한 농도로 MRA가 포함된 배지를 사용하시면 됩니다.
3. MRA가 포함되지 않은 media에서 여러 차례 passage를 늘린 후 Mycoplasma Hoechst Stain Kit을 이용하여 mycoplasma 오염이 재발되지 않음을 확인합니다.

1. 1. Data on mycoplasma removal effect - spontaneous infection.
   

   	MRA		Tiamulin		Minocycline
   	MIC*	MMC**	MIC	MMC	MIC	MMC
   M. orale CH-19299	0.05	0.1	0.0031	3.13	0.05	25
   M. arginini G-230	0.1	0.2	0.0063	12.5	0.2	>100
   M. hyorhinis BST-7	0.05	0.1	0.0031	0.39	0.0031	0.39
   A. laidlawii PG-8	0.0125	0.025	0.05	>100	0.05	>100
   MMC/MIC	2		128 ----------> 2048		512 ----------> 2048

   + = Mycoplasma positive
   - = Mycoplasma negative
   Duration treated with MRA: 7 days
2. 2. Efficacy comparison of MRA and pharmaceuticals on the market.
   

   	MRA		Tiamulin		Minocycline
   	MIC*	MMC**	MIC	MMC	MIC	MMC
   M. orale CH-19299	0.05	0.1	0.0031	3.13	0.05	25
   M. arginini G-230	0.1	0.2	0.0063	12.5	0.2	>100
   M. hyorhinis BST-7	0.05	0.1	0.0031	0.39	0.0031	0.39
   A. laidlawii PG-8	0.0125	0.025	0.05	>100	0.05	>100
   MMC/MIC	2		128 ----------> 2048		512 ----------> 2048

   M. = Mycoplasma A. = Acholeplasma
   * = Minimum inhibitory concentration (ug/ml) ** = Minimum mycoplasmacidal concentration (ug/ml)
3. 3. MIC of MRA to other mycoplasma (ug/ml)
   

   Species	MIC
   Mycoplasma fermentans PG-18	0.0125
   Mycoplasma salivarium PG-20	0.1
   Mycoplasma hominis PG-21	0.1
   Mycoplasma buccale CH-20247	0.025

• ImmuMark™ MycoTest™
• Mycoplasma Hoechst Stain Kit