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 제품안내  형광시약   Protein Labeling

Mix-n-Stain CF dye antibody labeling kits

CF antibody labeling kit는 fluorescent antibody labeling에 필요한 dye와 buffer가 제공되는 kit이며, kit의 CF dye는 Alexa Fluor dyes나 다른 제품들 보다도 더 밝으며, 빛에 안정합니다.

Biotium
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    특징
  • 항체와 제공되는 buffer에 dye만 간단히 섞어주기만 하시면 되므로 사용이 간편합니다.
  • 섞어주신 후 30분 정도만 반응시키면 됩니다.
  • purify를 할 필요가 없습니다.
  • antibody stabilizer에도 안정합니다.
  • 가시광선과 near-IR spectra 파장에 걸쳐 가장 밝고 안정한 dye를 선택하실 수 있습니다.
  • 선택하시는 kit에 따라 5 ug에서 100 ug까지의 항체를 label할 수 있습니다.
    사용법
    Mix-n-Stain CF dye antibody labeling kits 사용법
    Dye Selection Guide
    If you are using CF dye λabs λem
    Alexa Fluor® 350, AMCA CF350 347nm 448nm
    Alexa Fluor® 405, Cascade Blue® dye, DyLight™ 405 CF405S 404nm 431nm
    Pacific Blue® dye, BD Horizon™ V450 CF405M 408nm 452nm
    Alexa Fluor® 488, DyLight™488, FITC, FAM, Cy™2 CF488A 490nm 515nm
    Alexa Fluor® 568, Lissamine rhoda- mine B, ROX CF™568 562nm 583nm
    Alexa Fluor® 594, Texas Red®, DyLight 594 and Cy™3 CF™594 593nm 614nm
    LightCycler® Red 640 (LC640) CF™620R 617nm 639nm
    Alexa Fluor® 633, Alexa Fluor® 647, Cy™5 and DyLight™ 649 CF™633 630nm 350nm
    Alexa Fluor® 647 and ATTO™ 647N, Cy™5 CF™640R 642nm 662nm
    Cy™5, Alexa Fluor® 647 and DyLight™ 649 CF™647 650nm 665nm
    Alexa Fluor® 660, Allophycocyanin (APC) CF™660R 663nm 682nm
    Alexa Fluor® 660, Allophycocyanin (APC) CF™660C 667nm 685nm
    Alexa Fluor® 680, Cy™5.5 CF™680R 680nm 701nm
    Alexa Fluor® 680, Cy™5.5 CF™680 681nm 698nm
    AF680, Cy5.5, DyLight680, IRDye680 CF Dye 681nm 698nm
    AF750, Cy7 CF680* 755nm 777nm
    DyLight800, IRDye800 CF750 770nm 797nm
    적용
    HeLa cells were stained with b-tubulin IgM conjugated with CF™633 Mix-n-Stain (red), followed by CF™488A phalloidin (green) and DAPI (blue). Images were captured on a Zeiss 510 Meta Confocal microscope.
    QnA
    1. CF란 어떤 dye며, Alexa Fluor dye와 차이점은 뭔가요?
    1. CF dye는 Biotium사에서 개발한 단백질과 핵산을 labeling하는 매우 수용성의 small organic dye입니다.
    2. 20 컬러 이상의 CF dye는 Alexa Fluor dye보다 더 밝고 빛에 안정하여 오랫동안 지속됩니다.
    2. Invitrogen사의 Zenon® antibody labeling kit에 비해 어떤 장점이 있나요?
    1. CF dye는 항체에 공유결합하여 부착하므로서 dye transfer나 multi-color staining시 항체간의 확산 염려가 없습니다.
    2. Zenon labeling reagent가 30분 안에 사용해야 하는 반면 Mix-n-Stain 화합물은 4도 이하의 온도에서 storage buffer안에서 최소 3달간 안정합니다.
    3. Zenon 제품이 항체의 fragment나 다른 linker를 이용하여 결합하는 것과 달리 Mix-n-Stain은 dye가 항체에 direct로 연결되기 때문에 화합물의 크기가 작습니다.
    4. dye/protein 비율에 대한 최적화과정이 필요없이 섞어주신 후, 염색하기만 하면 됩니다.
    3. Mix-n-Stain kit는 어떻게 선택하나요?
    각각의 CF dye는 labeling할 항체의 양에 따라 세가지 키트중에 선택하시면 됩니다.
    1) 50-100ug 2) 20-50ug 3) 5-20ug
    4. 예를들어 50ug의 항체를 label하고자 할 경우 50-100ug kit와 20-50ug kit 둘 중 어느것을 선택해야 하나요?
    어느 것을 선택하시든 결과를 얻는데 영향을 미치지는 않지만 더 작은 size의 kit(20-50ug)를 이용하는 것이 더 좋습니다.
    5. Mix-n-Stain kit로 항체와 다른 protein을 레이블링하는데 사용할 수 있나요?
    1. Mix-n-Stain kit는 IgG항체를 레이블링하는 데 최적화되어 있습니다.
    2. IgM 항체는 Denaturation을 유발할 수 있습니다.
    3. 다른 단백질을 레이블링하는데 권해드리지 않습니다.
    6. 항체의 농도도 중요한가요?
    1. 이 킷은 0.5~1.0mg/ml사이의 농도의 항체를 레이블링 하는데 최적화되어 있습니다.
    2. 만약 항체 농도가 너무 옅으면 농축을 해야하며 농도가 너무 높은 경우에는 1xPBS를 이용하여 dilution하셔야 합니다.
    3. 권장하는 항체의 농도를 벗어난 경우 레이블링 결과가 너무 낮거나 높을 수 있습니다.
    7. 레이블링 반응은 BSA나 젤라틴이 있어도 괜찮은가요?
    1. BSA나 젤라틴이 들어있지 않은 antibody stabilizer의 경우 최고의 레이블링 결과를 얻을 수 있습니다만, BSA나 젤라틴의 양이 항체 무게의 4배를 넘지 않는 양일 경우 지장은 없습니다.
    2. 만약 BSA나 젤라틴의 양이 이것을 초과할 경우 protein A purification과정이나 통상적으로 사용되는 antibody clean-up kit를 이용하여 제거해주시면 됩니다.
    8. Sodium azide, EDTA, sugars, glycerol, Tris, DTT, 2-mercaptoethanol과 amoni acids와 같은 small molecule stabilizer/buffer의 구성성분에도 레이블링 반응에 문제가 없나요?
    1. Sodium azide, EDTA, small sugar과 같은 경우에는 레이블링에 영향을 끼치지 않습니다. Tris나 glycerol의 경우 적은 레벨에는 영향을 끼치지 않지만 Tris나 glycerol이 높은 레벨이나 DTT, 2-mercaptoethanol과 amoni acid(ex. Glycine)이 있는 경우는 피해야 합니다.
    2. 이러한 small molecule stabilizer/buffer 구성분은 antibody clean-up kit로 쉽게 제거됩니다.
    9. 레이블링 반응 시간을 30분 보다 더 줄여도 되나요?
    1. 최적화 되어 있는 반응 시간은 30분 입니다. 하지만 20분까지 줄여도 좋은 결과를 얻을 수 있습니다.
    2. 만약 반응시간을 30분 이하로 줄일경우 염색하기전 제공된 storage buffer와 레이블된 항체 solution을 결합해서 사용해야 합니다.
    10. 키트에 제공되는 storage buffer외의 다른 버퍼에 화합물을 보관해도 되나요?
    1. Mix-n-Stain storage buffer는 Mix-n-Stain reaction buffer를 이용하여 항체 화합물을 만드는데 최적화될 수 있도록 만들어졌습니다.
    2. 다른 버퍼를 이용하여 화합물을 보관하는 것은 권해드리지 않습니다.
    11. 키트 구성품을 나누어 사용하거나 한번 더 사용 할 수 있나요?
    Mix-n-Stain 키트는 한번 레이블링 하도록 만들어졌으므로, 항체를 한번 이상 레이블 하거나 한번 더 사용 하는 것은 권해드리지 않습니다.
    12. Dye와 biotin이 함께 항체에 labeling 되는 것 같은데요, labeling 후에 어떤 식으로 detection 하면 되나요? Biotin이 있기 때문에 anti-streptavidin-FITC를 사용하면 되는 건가요?
    선생님께서 보신제품은 항체에 biotin을 labeling 해주는 kit이며, labeling 후 streptavidin-FITC을
    이용하신다면 형광현미경으로 확인하시면 됩니다.
    데이타시트의 아래내용을 보시면 streptaavidin을 포함한 형광물질이나 enzyme을 사용하여 기존의
    형광 detection 방법처럼 형광현미경으로 확인가능하다고 합니다.

    The Mix-n-Stain biotin antibody labeling kit can be used to attach this important hapten to biomolecules of interest for subsequent signal amplification detection with enzyme or fluorescent labeled streptavidin, avidin or neutravidin.
    13. Secondary antibody는 기존에 사용하던 antibody를 이용하면 되나요? 혹시 자사 제품만 이용해야 하나요?
    Antibody는 꼭 자사제품을 이용해야 하는 조건은 없으며, 선생님께서 기존에 가지고 있는 antibody를
    사용해도 됩니다.
    14. Secondary antibody 사용 후, 어떤 substrate를 넣든지 형광을 볼 수 있는 것인가요?
    일반적으로 Streptavidin-Biotin 형광반응시에는 Substrate를 처리할 필요가 없습니다.
    컬러방법으로 확인시에 Substrate처리가 필요하며, 2차 항체에 HRP congugate가 되어있다면
    DAB 나 AEC Substrate를 사용하는게 일반적입니다.
주문정보(Ordering Information)
CATNUM PRODUCT SIZE
92266Mix-n-Stain Biotin antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92286Mix-n-Stain Biotin antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92244Mix-n-Stain Biotin Antibody Labeling Kit, 1x(50-100ug) labeling1 labeling
92250Mix-n-Stain CF350 antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92270Mix-n-Stain CF350 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92230Mix-n-Stain CF350 antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92252Mix-n-Stain CF405M Antibody Labeling Kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92272Mix-n-Stain CF405M antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92232Mix-n-Stain CF405M Antibody Labeling Kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92251Mix-n-Stain CF405S antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92271Mix-n-Stain CF405S antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92231Mix-n-Stain CF405S antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92253Mix-n-Stain CF488A antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92273Mix-n-Stain CF488A antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92233Mix-n-Stain CF488A antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling 1 labeling
92254Mix-n-Stain CF555 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92274Mix-n-Stain CF555 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92234Mix-n-Stain CF555 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling1 labeling
92275Mix-n-Stain CF568 Antibody Labeling Kit, 1x(5-20ug) labeling1 labeling
92255Mix-n-Stain CF568 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92235Mix-n-Stain CF568 antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92256Mix-n-Stain CF594 antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92276Mix-n-Stain CF594 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92236Mix-n-Stain CF594 antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92257Mix-n-Stain CF633 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92277Mix-n-Stain CF633 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92237Mix-n-Stain CF633 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling 1 labeling
92258Mix-n-Stain CF640R antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92278Mix-n-Stain CF640R Antibody Labeling Kit, 1x(5-20ug) labeling1 labeling
92245Mix-n-Stain CF640R antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling1 labeling
92259Mix-n-Stain CF647 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92279Mix-n-Stain CF647 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92238Mix-n-Stain CF647 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling1 labeling (50-100 ug)
92260Mix-n-Stain CF660C antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92280Mix-n-Stain CF660C antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92239Mix-n-Stain CF660C antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92281Mix-n-Stain CF660R Antibody Labeling Kit, 1x(5-20ug) labeling1 labeling
92261Mix-n-Stain CF660R antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92243Mix-n-Stain CF660R antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92262Mix-n-Stain CF680 antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92282Mix-n-Stain CF680 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92240Mix-n-Stain CF680 antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92263Mix-n-Stain CF680R antibody labeling kit, 1X(20-50ug) labeling1 labeling
92283Mix-n-Stain CF680R antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92246Mix-n-Stain CF680R antibody labeling kit, 1X(50-100ug) labeling1 labeling
92264Mix-n-Stain CF750 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92284Mix-n-Stain CF750 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92241Mix-n-Stain CF750 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling1 labeling
92265Mix-n-Stain CF770 antibody labeling kit, 1x(20-50 ug) labeling1 labeling
92285Mix-n-Stain CF770 antibody labeling kit, 1X(5-20ug) labeling1 labeling
92242Mix-n-Stain CF770 antibody labeling kit, 1x(50-100 ug) labeling1 labeling
92300Mix-n-Stain HRP Antibody Labeling Kit, 1x(10-20ug) labeling1KIT
92301Mix-n-Stain HRP Antibody Labeling Kit, 1x(25-50ug) labeling1KIT
92302Mix-n-Stain HRP Antibody Labeling Kit, 1x(50-100ug) labeling1KIT
92298Mix-n-Stain RPE Antibody Labeling Kit, 1x(25-50ug) labeling1KIT
92299Mix-n-Stain RPE Antibody Labeling Kit, 1x(50-100ug) labeling1KIT