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 제품안내  면역학   Cancer Research  Luciferase Assay

Renilla Luciferase Assay Kit

Renilla luciferase는 in vitro, in vitro상에서 유전자의 조절과 기능을 연구하기 위해 사용되어지는 reporter gene으로, Renilla Luciferase Assay Kit는 쉽고 간편하며 뛰어난 민감도로 renilla luciferase를 측정할 수 있도록 고안된 제품입니다.

Biotium
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특징
  • Renilla luciferase는 in vitro, in vivo상에서 유전자의 조절과 기능을 연구하기 위해 사용되어지는 reporter gene입니다.
  • 최근에 Renilla luciferase는 multiplex transcriptional reporter assay나 Firefly luciferase assay에서 transfection 정도를 표준화(normalization)하는 컨트롤로 많이 사용되고 있습니다.
  • Renilla luciferase는 36,000Da의 단량체(monomer)로서 산소를 이용해 coelenterazine의 산화 반응을 촉매함으로써 빛을 발생하게 됩니다.
  • 이 효소는 효소의 활성을 위해 따로 post-translational modification을 할 필요가 없으며, translation 에 의해 곧바로 유전적 reporter로서의 기능을 수행합니다.
  • Coelenterazine native는 자연적인 Renilla luciferase의 기질(substrate)입니다. 그러나, 수많은 coelenterazine analog들이 합성되어져서 상품화되고 있습니다.
  • coelenterazine analog들은 서로 다른 성질의 emission wavelength, cell membrane permeability, quantum efficiency등으로 renilla luciferase의 다양한 기질로 사용할 수 있습니다.
  • coelenterazine은 자연발광(autoluminescence)으로 알려져있는 효소 없이 산화하여 인해 빛을 발산할 수 있습니다.
  • 자연발광은 세포와 조직내에 있는 superoxide anion과 peroxynitrite에 의해 증폭되어집니다.
  • Renilla Luciferase Assay Kit는 쉽고 간편하게 Renilla luciferase를 측정할 수 있도록 고안된 제품입니다.
  • 특별한 coelenterazine 유도체와 버퍼들을 사용하여 백그라운드의 자연발광을 적게하고 뛰어난 민감도의 믿을 수 있는 결과를 얻을 수 있도록 설계되어 있습니다.
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장점
  • Linearity: Renilla luciferase reporter에 DNA(0.001ug에서 1ug)를 재조합하여 transfection을 한 후, luciferase 유전자와 빛 output 을 선형화 할 수 있습니다.
  • Low Autoluminescence & Sensitivity: 자연발광 백그라운드를 줄이고 특정한 기질 사용으로 민감도가 뛰어납니다.
  • Convenience: Lysate는 Firefly luciferase assay를 위해 사용될 수 있습니다.
사양
150 assays 구성품 (30004-1)   150ul Coelenterazine, 100 X
10ml 5 X Renilla Luciferase Assay Lysis Buffer
10 ml Renilla Luciferase Assay Buffer
10 ml Renilla Luciferase Assay Enhancer
1 Protocol
1000 assays 구성품 (30004-2)   1000ul Coelenterazine, 100 X
30ml 5 X Renilla Luciferase Assay Lysis Buffer
50 ml Renilla Luciferase Assay Buffer
50 ml Renilla Luciferase Assay Enhancer
1 Protocol
원리
Renilla Luciferase Assay Kit 원리
Figure 1. Bioluminescent reaction catalyzed by Renilla Luciferase.
적용
Renilla Luciferase Assay Kit 적용
Figure 2. Dose response curve of transfected Renilla Luciferase gene.
PC3 cells were transfected with 0.001ug, 0.01ug, 0.1ug, and 1ug pRL-CMV vector (Promega) encoding Renilla luciferase using Fugene 6 (Roche) in 6-well cell culture dishes. pGL2 Basic vector (Promega) was used as a control and for normalizing total DNA vector level to 1ug per transfection. 24 hours after transfection, cells were harvested using 500ul lysis buffer contained in Biotium's Renilla Luciferase Assay Kit. To assay luciferase activity, 20ul of lysate from each sample was then added to 100 ul of assay buffer with Enhancer also in Biotium's Renilla Luciferase Assay Kit. Luminescence was measured on a luminometer (Tumer Designs). Light emission was integrated over 10 secends without delay.
주문정보(Ordering Information)
CATNUM PRODUCT SIZE
30004-2Renilla Luciferase Assay Kit1000 assays
30004-1Renilla Luciferase Assay Kit150 assays