[FAQ] AAV (Adeno-Associated Virus) 제작 서비스
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1. AAV (Adeno-Associated Virus)의 장점은 무엇입니까? |
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AAV는 병원성이 없고 면역원성이 낮아서 in vivo 사용에 적합하고 유전자치료제로 사용될 수 있습니다. 특히 특정 조직/기관에 specific하게 유전자의 발현을 유도할 수 있습니다. |
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2. Adenovirus와의 차이점은 무엇인가요? |
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아데노바이러스는 Adenoviridae에 속하는 dsDNA 바이러스이고, AAV는 Parvoviridae에 속하는 ssDNA입니다. 둘다 in vivo 실험에 적합하지만, 실험용도의 측면에서 가장 큰 차이점은 유전자 발현기간입니다. 아데노바이러스는 2-3일 정도 transient expression을 유도하는 반면, AAV는 수 개월에서 최대 1년까지 stable expression이 가능합니다. |
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3. in vivo에서 발현하는 AAV는 언제 확인할 수 있나요? |
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in vivo 발현 확인이 가능한 시기는 바이러스 투여 후 최소 1-2주 이내에서 10주정도까지 실험조건에 따라 큰 차이가 있습니다. |
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4. in vitro에서 발현하는 AAV는 언제 확인할 수 있나요? |
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infection 후 24시간 부터 관찰이 가능하나, 투여 후 2-3일 정도에 발현을 평가합니다. |
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5. AAV를 동물에 사용시 얼마나 사용할 수 있나요? |
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1x10E13 VG/ml AAV 5ul (5x10E10VG)를 마우스에 injection할 경우 최대 200마리까지 사용가능합니다. |
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6. AAV는 어떻게 보관해야 하나요? |
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-80'C/-20'C 에서 24개월까지 보관이 가능하며, 4'C에서는 약 2주정도 보관이 가능합니다.
반복된 freezing/thawing을 피하기 위해 최초 해동 시 적당량을 분주하여 보관합니다.
조성이 다른 버퍼에 희석한 후 다시 얼리는 것은 바람직하지 않습니다. |
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7. Serum이 포함 된 배지를 사용해도 되나요? |
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In vitro 실험에서 FBS(Fetal bovine serum)와 Calf serum은 AAV infection에 영향을 미치지 않습니다. 사람의 44%가 AAV의 항체를 가지고 있습니다. 그러므로 Human serum을 사용해야 하는 경우, neutralizing antibody의 titer test를 진행하는 것이 좋습니다. |
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8. 정맥주사를 통해 들어간 AAV는 어디로 이동하게 되나요? |
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Serotype, 투여량, 투여경로, 시간에 따라 차이가 있습니다. 꼬리정맥을 통해 주입 된 AAV2는 주로 폐, 간에서 탐지가 가능합니다. 폐와 간 이외의 다른 장기에서도 검출이 되지만 상대적으로 미미한 양입니다. |
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