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제  목   real time PCR 문의드립니다.
이  름 박주희 등 록 일 2018-10-13 조 회 수 53
안녕하세요.
Real time PCR 실험관련하여 문의드립니다.
Standard sample로 serial dilution을 하여 probe방식으로 primer efficiency를 보려고 하는데 디자인한 primer/probe 여러 종류에서 한 종류의 target에서만 NTC가 너무 빠르게 증폭이 됩니다. 그리고 sample의 경우도 ct값이 빨리 증폭이 되고 어느순간 NTC와 같은 ct값을 보입니다.
예를 들면, 아래 표와 같이 값이 대략 나오는데, limit of detection은 대략 10^3정도이다라고 이해가 가는데, 보통 standard curve를 그리면 37-9까지는 그려져야 할 것 같은데, 29 이상으로는 ct값이 나타나지 않고 30전에 NTC와 함께 증폭이 끝납니다. 이런 경우는 처음이라서, 어떤 부분이 문제가 있는지, 어떤 부분을 해결하면 될지 도움 부탁드립니다. 감사합니다.
sample/Ct
10^6 /20
10^5 /23
10^4 /26
10^3 /29
10^2 /29
10^1/29
10^0/29
NTC/29



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