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FBS (Fetal Bovine Serum)

FBS란 무엇입니까?
FBS(Fetal Bovine Serum)란 소태아혈청으로써, 세포 성장에 필수적인 growth factor, cytokine, protein들이 다양하게 포함되어 있습니다.
일반적으로 배지의 첨가제로 사용되며, 세포 성장, 세포 부착, 확산과 관련된 factor를 제공합니다.
FBS의 보관 및 사용기간은 어느 정도 입니까?
FBS는 빛을 차단한 상태로 냉동 보관하며, 해동 시에는 냉장 상태로 천천히 녹여 침전을 방지합니다. 사용 하루 전, 냉장고에 미리 넣어 천천히 해동하는 것을 권장드립니다. 또한 사용 양에 맞춰 분주하여 보관하시면 해동이 편리합니다.
한번 녹인 FBS는 바로 사용이 가능하며, 2-8°C에서 4주 정도 보관이 가능하나 침전물 발생 가능성이 있으므로 되도록 해동 후 바로 사용할 것을 권장합니다.
Heat Inactivation 과정은 무엇이며, 사용 전 꼭 진행해야 하나요?
Heat inactivation 과정이란 혈청 속의 Complement protein이나 Mycoplasma를 제거하는 과정입니다. 그러나 이 과정 동안 다른 유용한 amino acid, vitamins, growth factor들도 파괴될 수 있습니다.
Low endotoxin 제품을 사용할 경우 Heart inactivation 과정은 필요하지 않습니다. 단, 면역학 실험을 위한 세포(Stem cell, Insect Cell)에 대해서는 Heat Inactivation을 진행하는 경우도 있습니다.
어떻게 Heat Inactivation 하면 되나요?
냉동 상태의 FBS를 냉장에서 서서히 녹인 후, 56°C의 water bath에서 30분 동안 incubation합니다. 이때는 침전물이 생기지 않도록 10분마다 흔들어 주며, 정확히 56°C의 온도를 지켜주어야 합니다.
FBS를 테스트하는 방법이 있습니까?
FBS를 테스트하는데에 정해진 방법은 없습니다. 그러나 일반적인 방법은 다음과 같습니다.
테스트하고자 하는 FBS가 포함된 배지와 control FBS가 포함된 배지에 각각 10 cells/well, 100 cells/well, 1,000 cells/well로 세포를 seeding 합니다. 배지를 교체하지 않고 두 배지 사이의 차이점을 12~24시간 단위로 관찰합니다.
FBS 상태에 따라 세포의 성장속도, morphology 등에 차이가 발생하게 됩니다.