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자주묻는 질문
SmartFlare™ RNA Detection Probes
SmartFlare란 무엇인가요?
Nanoparticle probe로써, 별도의 Sample prep, Cell lysis 과정 없이 살아있는 세포에 들어가 gene expression을 실시간 확인할 수 있는 제품입니다.
타겟 RNA의 양을 측정하는 원리가 궁금해요.
SmartFlare probe는 두 가닥의 oligo가 결합된 Gold nanoparticle로 구성되어 있습니다. 그 중 형광물질이 붙어있는 한 가닥의 oligo는 gold core와의 접근이 가까워질 경우 형광이 소멸되고, gold core와 멀어질 경우, 형광을 띄게 됩니다.
SmartFlare가 세포 내로 들어가고 세포 내 타겟 RNA가 존재 할 경우, 형광이 붙어있는 oligo는 particle로부터 떨어져 나가게 되고 대신 타겟 RNA가 gold nanoparticle의 나머지 한가닥과 결합하게 됩니다. 또한 중심부의 gold particle에서 떨어져 나간 oligo는 형광을 띄게 됩니다.
따라서 세포 내 타겟 RNA가 존재하고 발현 양이 많을 수록 측정된 형광 값은 커지게 되는 원리입니다.
사용하기 전, Sample prep이 필요하지 않나요?
Transfection, Cell lysis 등의 샘플 전처리 과정이 필요하지 않습니다. SmartFlare™ reagent를 세포가 있는 배앵액에 바로 첨가하여 overnigt(16시간) 배양시킨 후, 형광을 확인합니다. 귀중한 샘플이라 prep하기 어려울 때, 복잡한 lysis 과정을 건너뛰어 시간을 단축해야할 때 사용이 적합합니다.
세포의 재사용이 가능하다고 하였는데, 세포로 들어간 Smartflare는 얼마가 지나야 세포에서 빠져나오나요?
RNA 발현을 확인하신 후, 2-3일이 지나면 exocytosis를 통해 세포에서 Smartflare가 방출되며, 형광현미경 등을 통해 probe가 빠져나온 것을 확인할 수 있습니다. Smartflare는 non-toxic한 제품으로 cell에 영향을 미치지 않기 때문에, Probe가 완전히 빠져나간 cell은 다른 실험에 재사용할 수 있습니다.
제품 당 용량은 얼마이며, 얼마나 사용할 수 있나요?
제품의 용량은 50ul이며, 96 well plate 기준으로 250 reaction이 가능합니다. (example: 30,000 cells in a 200μL media volume within each well of a 96 well plate)
결과를 측정하기 위해 별도로 특정 기기를 구매해야 하는건 아닌가요?
Microscope, cell analyzer, flow cytometer, cell sorter 등 형광을 측정할 수 있는 모든 기기와 호환이 가능합니다. 아래의 표를 참고하여 실험 조건에 맞는 기기를 선택하세요.
Microscopy Cell Analyzer Flow Cytometry Imaging Flow Cytometry Cell Sorter
Live Cell Analysis V V V V V
Visualization V V
Relative Quantitation V V V V
Single Cell Analysis V V V V V
Sorting Capabilities V
96-well Format V V V
Probe가 세포 안으로 제대로 들어갔는지 확인하고 싶습니다. 제품에 대한 Positive 혹은 Negative Control을 선택할 수 있나요?
3가지 Control 중 실험에 적합한 SmartFlare™ controls을 사용하여 결과에 대한 신뢰성을 확인할 수 있습니다.
  • Uptake Control: Positive control probe로써, 세포 내로 들어가면 항상 형광을 띄게 됩니다.
  • Scramble Control: Negative control로써, 세포 내의 모든 시퀀스를 인식하지 못합니다.
  • Housekeeping Control: 세포 내에서 높은 수준으로 발현되는 것으로 잘 알려진 시퀀스를 인식하므로, positive control로써 사용이 가능합니다.
SmartFlare로 이용할 수 있는 application을 알려주세요.
  • RNA Detection (Gene expression analysis)
  • Cell Sorting
  • miRNA Detection
  • Reuse your SmartFlare™ probe-treated cells
제품 목록 중 원하는 타겟의 제품이 없습니다. Custom 서비스도 진행하는지요?
Smartflare 제품은 계속 업데이트 중 입니다. Custom RNA Detection Probes 서비스는 현재 준비중으로 진행 예정에 있습니다.