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SNAP i.d. Western Blot System

SNAP i.d. 장치를 이용하면 정말 30분안에 western이 끝나나요?
네, 그렇습니다. SNAP i.d.는 vaccum을 이용하여 buffer나 용액들을 멤브레인에 빠르고 고르게 흡수시킴으로서shaking으로 오랫동안 기다려야 했던 incubation시간을 단축시켜줍니다.
따라서, 기존의 방법으로 최소 4시간이상 걸렸던 western을 단 30분안에 끝낼수 있습니다.
SNAP i.d. 장치로 어느단계 실험을 진행할수 있나요?
일단 전기영동후, 멤브레인으로 단백질 밴드를 transfer한뒤에 SNAP i.d.를 이용하여, blocking → 1차항체 반응 → washing → 2차항체 반응 → washing의 단계를 진행하게 됩니다.
SNAP i.d. 장치외에 어떤 장치가 추가로 더 필요한가요?
vacuum을 제공할수 있는 아래의 별도 장치가 추가로 필요합니다.
(모두 고마로 연락주시면 편리하게 제공받으실수 있습니다.)
  • a) Vacuum source (pump or other uniform vacuum source)
  • b) Vacuum tubing to connect flask to vacuum source
  • c) Filter to protect the pump or vacuum source (Millex®-FA50)
  • d) Flask trap (1 or 4 L) with No 8 perforated stoppers (XX1004708)
SNAP i.d. 장치를 사용하기 위해서 필요한 vacuum source는 어떤 타입인가요?
SNAP i.d. 장치는 실험실에서 가장많이 사용하는 “house” vacuum sources나 vacuum pumps에 모두 사용될 수 있습니다.
사용하신 항체를 회수하기 위해서는 12” Hg (410 millibar)의 vaccum이 필요합니다.
저희 실험실에 있는 vaccum 장치의 압력이 너무 높거나 낮으면 사용할 수 없는 건가요?
SNAP i.d. 장치 내부에는 vaccum regulator가 있어 blot holder가 받는 vaccum의 양을 조절해 주기 때문에 걱정하지 않으셔도 됩니다.
다만, vaccum의 힘이 너무 낮을 때는 사용한 용액의 flow rate이 적합하지 않아 높은 백그라운드를 갖게 됩니다.
장치를 사용하는데 필요한 가장 기본적인 vaccum은 8” Hg (270 millibar)이며, 항체를 회수하는데는 12” Hg (410 millibar)이 필요합니다.
Vaccum을 작동할 때 가끔 소음이 나는데 왜그런건가요?
그것은 장치 내부에 장착되어 있는 vaccum regulator의 공명진동에 의한 것입니다.
만약 그럴 경우에는 소음이 멈출때까지 vaccum을 주입하여 조정해주세요.
장치가 양쪽면으로 나누어져 있는데 한쪽만 사용할 수 있나요?
장치는 양쪽면으로 나누어져 있지만 각각 독립적으로 작용하기 때문에, 샘플이 적을 경우 한쪽만 사용하시면 됩니다.
반면, 샘플이 많을 경우에는 6장의 멤브레인을 한 번에 western blot 할수 있으므로, 한번에 6가지 다른 조건을 체크할수 있습니다.
SNAP i.d. 장치로 fluorescent detection도 가능한가요?
네, 가능합니다. 보다 상세한 자료는 다음의 기사를 참고하세요.(AN1967EN00 >>)